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當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章> QPCR
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  • 1598 次 MIQE指南——RT-qPCR中的RNA質(zhì)量控制 2023-3-15
    1. 如何對(duì)污染進(jìn)行監(jiān)測(cè)？RNA質(zhì)量控制分為三個(gè)部分，一是濃度，二是純度，三是完整性。對(duì)于基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)來說，了解物質(zhì)的起始濃度是很重要的。在比較來自不同樣本的結(jié)果時(shí)，應(yīng)使用相同的樣本量。

  • 1968 次 THz-PCR技術(shù)在法醫(yī)檢測(cè)中展現(xiàn)的應(yīng)用前景 2023-2-27
    PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，應(yīng)用十分廣泛，而THz(Tera Hertz,太赫茲)是波動(dòng)頻率單位之一，指頻率在0.1~10 THz(波長為3000～30μm)范圍內(nèi)的電磁波

  • 3925 次 MIQE指南：RT-qPCR中的定量策略詳解 2023-2-13
    1. 簡介MIQE (Minimum Information for Publication of Ouantitative Real-Time PCR Experiments) 指南是關(guān)于qPCR實(shí)驗(yàn)發(fā)表文章時(shí)所必需的實(shí)驗(yàn)信息提出的最低限度的標(biāo)準(zhǔn)。目的是讓作者能夠設(shè)計(jì)和

  • 1201 次 染色質(zhì)免疫共沉淀ChIP實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟 2023-2-10
    染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)，是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的經(jīng)典方法。開始 ChIP 之前要考慮三件事（1）為您的實(shí)驗(yàn)查找適合的抗體（2）優(yōu)化染色質(zhì)剪切（3）評(píng)估您

  • 2916 次 qPCR反應(yīng)實(shí)驗(yàn)操作流程中的常見問題及解答 2023-1-11
    實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)（real-time PCR）也叫qPCR（Quantitave PCR），是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過特定數(shù)學(xué)原理對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

  • 1075 次 如何有效避免無處不在的PCR污染 2023-1-3
    前言在PCR檢測(cè)過程中，不可否認(rèn)的是，沒有任何檢測(cè)是100%準(zhǔn)確的，比如我們可能也曾聽過假陽性這個(gè)名詞，那為什么會(huì)出現(xiàn)假陽性呢?這其實(shí)跟實(shí)驗(yàn)操作過程造成的污染相關(guān)，在實(shí)驗(yàn)開展過程中，主要有

  • 3870 次 RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄技術(shù)詳解 2022-12-27
    前言RT-PCR就是逆轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse transcription PCR）或稱為反轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse transcription-PCR，RT-PCR），是以RNA為材料應(yīng)用于PCR擴(kuò)增中的一種實(shí)驗(yàn)方法。首先通過逆轉(zhuǎn)錄酶將總RNA或信使R

  • 1770 次 PCR蓋緊蓋子試劑蒸發(fā)問題詳解 2022-12-6
    導(dǎo)讀在PCR實(shí)驗(yàn)中，我們加完反應(yīng)體系后，都會(huì)認(rèn)真仔細(xì)的蓋好蓋子，并反復(fù)確認(rèn)已經(jīng)蓋好了蓋子，以避免出現(xiàn)試劑蒸發(fā)的情況�？墒怯袝r(shí)候我們也會(huì)有一些疑惑：明明已經(jīng)確認(rèn)蓋子蓋緊了，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，還

  • 4415 次 熒光定量PCR對(duì)照詳解 2022-11-4
    前言吾日三省吾身，定量實(shí)驗(yàn)做對(duì)照了嗎？在熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中遇到?jīng)]有曲線、曲線異常等情況，我們總是會(huì)在第一時(shí)間去看陽性對(duì)照和陰性對(duì)照的擴(kuò)增情況來分析原因。由此可見，實(shí)驗(yàn)中做對(duì)照的重要性

  • 2550 次 PCR耗材選擇的問答詳解 2022-10-25
    導(dǎo)讀俗話說的好，工欲善其事，必先利其器。耗材的選擇對(duì)得到滿意的PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要。在分析PCR結(jié)果時(shí)，我們往往側(cè)重于對(duì)引物、酶的濃度、溫度和時(shí)間的分析，卻忽略了PCR耗材也是影響因素之一

  • 2269 次 多重PCR技術(shù)要點(diǎn)解析 2022-10-20
    多重PCR概述多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復(fù)合PCR，它是在同一PCR反應(yīng)體系里加上二對(duì)以上引物，同時(shí)擴(kuò)增出多個(gè)核酸片段的PCR反應(yīng)，其基本原理與常規(guī)PCR相同，區(qū)別在于多重PCR反應(yīng)體

  • 2766 次 Taq酶選型三要素：擴(kuò)增效率、酶動(dòng)力、靈敏度 2022-9-5
    導(dǎo)讀目前國內(nèi)市場(chǎng)上銷售的熱啟動(dòng)Taq酶的品牌很多，但真正高質(zhì)量的熱啟動(dòng)Taq酶并不多，面對(duì)這么多的熱啟動(dòng)Taq酶產(chǎn)品，我們應(yīng)如何選擇？首先，選擇擴(kuò)增效率高的熱啟動(dòng)Taq酶耐受性好的Taq酶反應(yīng)體系

  • 4559 次 qPCR體系優(yōu)化和常見問題解析大全 2022-8-15
    前言聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是用于擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR（以下簡稱qPCR）作為第二代PCR技術(shù)，自1996年推出以來，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原微生物檢測(cè)、

  • 4135 次 普通PCR引物與qPCR引物的對(duì)比與選擇詳解 2022-8-3
    導(dǎo)讀說起引物，大家都再熟悉不過了。引物，在核苷酸聚合作用的起始時(shí)，可以刺激合成另一種大分子，并與反應(yīng)物以共價(jià)鍵形式連接的序列。在核酸化學(xué)中，引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段，可結(jié)合在

  • 4494 次 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中熒光標(biāo)記的選擇詳解 2022-7-22
    熒光定量PCR技術(shù)是將常規(guī)的PCR和熒光檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，以此實(shí)現(xiàn)對(duì)初始模板的定量分析。熒光定量PCR技術(shù)作為當(dāng)今生物學(xué)研究的重要手段之一，在基礎(chǔ)科學(xué)、生

  • 1717 次 qPCR實(shí)驗(yàn)之核酸提取MIQE明確的要點(diǎn)詳解 2022-6-22
    前言MIQE是描述評(píng)估qPCR實(shí)驗(yàn)所需的最小信息，該指南是稿件投稿時(shí)需要同時(shí)提交的一個(gè)清單。通過作者提供相關(guān)的實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)特點(diǎn)，審稿人可以評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)所用方法的可靠性。另外提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)所用

  • 1383 次 qPCR實(shí)驗(yàn)中安全科學(xué)地取材操作詳解 2022-6-10
    規(guī)劃一個(gè)qPCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，最先碰到的問題就是研究目的和材料的選擇。要想做好一個(gè)qPCR實(shí)驗(yàn)首先要根據(jù)目的選好材料。以目標(biāo)為導(dǎo)向的取材研究目標(biāo)的設(shè)立是非常重要的一個(gè)起始環(huán)節(jié)，所以對(duì)于樣本取材要

  • 3570 次 如何處理實(shí)時(shí)熒光定量PCR的數(shù)據(jù)詳解 2022-6-6
    實(shí)時(shí)熒光定量PCR數(shù)據(jù)中的基本概念：在整個(gè)擴(kuò)增過程中會(huì)出現(xiàn)基線期，指數(shù)期，線性期和平臺(tái)期。其中在基線期和指數(shù)增長期，擴(kuò)增產(chǎn)物都是以指數(shù)級(jí)增長，但是在基線期我們沒辦法檢測(cè)；而到了線性期和

  • 2716 次 PCR原理、PCR擴(kuò)增影響因素及預(yù)防詳解 2022-5-10
    PCR簡介聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR)是利用一段DNA為模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下，將該段DNA擴(kuò)增至足夠數(shù)量，以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析的一種反應(yīng)。PCR擴(kuò)增原理核

  • 6667 次 qPCR擴(kuò)增過程中影響Ct值的因素及解決辦法詳解 2022-4-27
    導(dǎo)讀Ct值是熒光定量PCR重要的結(jié)果呈現(xiàn)形式，它被用于計(jì)算基因表達(dá)量差異或者基因拷貝數(shù)。那么熒光定量的Ct值多大被認(rèn)為是合理？如何保證Ct值的有效范圍呢？ Ct值以及Ct值的作用：Ct值概念：也稱

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