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> 技術(shù)文章> QPCR
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實驗過程中核酸降解的預(yù)防手段與方法
2022-4-14
導(dǎo)語在實驗過程中,最心累的莫過于好不容易提取的核酸卻降解了。那么核酸為什么會發(fā)生降解呢,我們又該如何預(yù)防呢?關(guān)于核酸降解,你了解多少呢?讓我們一起對核酸降解一探究竟吧。 什么是核酸
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移取PCR Master Mix對qPCR結(jié)果的準(zhǔn)確性的影響
2022-3-30
Overview定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)分析具有高靈敏度,這是其成功并廣泛應(yīng)用于科學(xué)實驗室的最重要原因之一。然而,包括移液技術(shù)在內(nèi)的許多因素都會對qPCR分析的結(jié)果產(chǎn)生影響。在進(jìn)行基于PCR原理的
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如何改進(jìn)qPCR數(shù)據(jù)報告
2022-2-24
關(guān)于實時熒光定量PCR技術(shù),最常見的應(yīng)用是通過RT-qPCR進(jìn)行基因表達(dá)分析、疾病診斷和管理(如病毒定量)、食品檢測(如轉(zhuǎn)基因或過敏原分析)以及動物或植物育種等研究。這種方法非常靈敏,因此為
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影響qPCR最終效果的六個要素分析與解決方法
2021-12-14
實時熒光定量PCR:在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)(探針或染料),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR反應(yīng)過程,最后通過Cq或Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對起始模板進(jìn)行絕對定量或相對定量分析。而評估熒光定量P
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qPCR擴(kuò)增曲線的問題綜述與解決方法總結(jié)
2021-12-1
大家好!首先跟大家做一個自我介紹:我是擴(kuò)增曲線,來自熒光定量PCR,是用于描述qPCR動態(tài)進(jìn)程的曲線,我有兩種形態(tài),一種是線性圖譜:橫坐標(biāo)是循環(huán)數(shù),縱坐標(biāo)是熒光強(qiáng)度值;另一種是對數(shù)圖譜:橫
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Azure Cielo™實時熒光定量PCR系統(tǒng)在檢測低拷貝端;虻膽(yīng)用
2021-11-24
我們都知道在實時定量PCR(qPCR)中,可以通過Cq值和標(biāo)準(zhǔn)曲線得出樣本的初始拷貝數(shù)。但Cq值與樣品中靶標(biāo)的拷貝數(shù)有關(guān),也會受到PCR反應(yīng)的效率和儀器檢測靈敏度的影響。高靈敏度的儀器可以減少檢
6785
次
一文攬盡:熒光定量PCR擴(kuò)增曲線哪個階段最重要
2021-11-17
qPCR擴(kuò)增曲線一般分成四個階段:基線期、指數(shù)期、線性期和平臺期。那么每個階段PCR產(chǎn)物量的變化都有什么區(qū)別呢?哪個階段最重要呢?小編這就一一道來;期PCR起始時,剛開始前幾個循環(huán)的熒光
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針對新手專用PCR原理講解與分析
2021-11-9
什么是實時熒光定量PCR(qPCR)?在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過Cq值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對起始模板進(jìn)行定量分析的方法。一.使DNA產(chǎn)物發(fā)出熒光的常用標(biāo)記方
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Azure Cielo™ 實時熒光定量PCR系統(tǒng)在快速可靠地檢測新冠病毒的應(yīng)用
2021-11-3
在應(yīng)對病毒性大流行疾病時,為了有效控制病毒傳播和減少感染人群,快速且可靠的診斷是至關(guān)重要的。那么目前檢測COVID-19的 "黃金標(biāo)準(zhǔn) "依賴于一種成熟的技術(shù),即反轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈反
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新手須知的qPCR操作技巧詳解(下篇)
2021-8-26
上一篇文章跟大家介紹了qPCR實驗中引物設(shè)計及加樣的相關(guān)操作技巧,今天我們再跟大家分享其他的實用技巧,這些入門級知識一定要掌握牢固哦。1、陰性對照的技巧:陰性對照一般是指用水代替模板的反
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MeRIP-qPCR方法原理、結(jié)果含義、展示方法及應(yīng)用細(xì)談
2021-8-10
m6A等RNA修飾的主要研究手段是通過MeRIP方法對發(fā)生修飾的片段進(jìn)行富集,其后進(jìn)行高通量測序分析修飾位點。而無論是一篇僅展示修飾位點分布特點的譜學(xué)文章,還是深入研究修飾調(diào)控基因表達(dá)機(jī)制的文
2976
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PCR Efficiency在線分析工具在預(yù)測PCR擴(kuò)增效率的使用
2021-7-30
目前已開發(fā)多種工具可以進(jìn)行PCR引物的設(shè)計,但大多數(shù)工具只考慮避免發(fā)夾結(jié)構(gòu)形成、3'末端核苷酸的選擇、引物解鏈溫度等問題,并沒有考慮內(nèi)在擴(kuò)增子的特征以及沒有預(yù)測給定擴(kuò)增子和引物對的P
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新手須知的qPCR操作技巧(上篇)
2021-7-30
實時熒光定量 PCR(qPCR)自問世以來,就受到了廣大生命科學(xué)實驗工作者和醫(yī)院檢驗工作者的極大關(guān)注,使得該技術(shù)得到了很快的普及。雖然qPCR技術(shù)目前應(yīng)用方向十分廣泛,但是仍碰到很多用戶在實驗
54920
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熒光定量PCR實驗流程中常見的陰性對照與陽性對照介紹
2021-7-15
什么鬼?實驗結(jié)果又不理想,Ct值怎么又這么大呢?是哪一步出現(xiàn)了問題呢?哎哎哎,怎么沒有擴(kuò)增曲線呢?在您看到熒光定量 PCR 實驗結(jié)果時,是不是也發(fā)出過這樣的疑問呢?總感覺哪個實驗步驟出現(xiàn)了
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qPCR性能分析的四大要素-效率、線性動態(tài)范圍、檢測限和精密度
2021-6-28
MIQE指南中明確提出,進(jìn)行qPCR實驗時必須測定以下檢測性能特點:PCR的效率、線性動態(tài)范圍、LOD和精密度。1、PCR的效率:強(qiáng)大和精確的qPCR測定通常具有高效率。在報告目的基因相對于參照基因的mR
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實時熒光定量PCR引物設(shè)計原則中擴(kuò)增子大小對qPCR產(chǎn)量影響的應(yīng)用
2021-6-11
一般情況下,實時熒光定量PCR引物設(shè)計原則中會提到擴(kuò)增子大小對實時熒光定量PCR的擴(kuò)增效率有一定作用。所以通常建議使用相對較短的擴(kuò)增子長度,范圍為50到150個堿基對(bp)。由于小片段不太容易
3776
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MIQE中核酸質(zhì)量控制環(huán)節(jié)的操作簡易說明
2021-6-3
RNA樣本:比較不同的樣本時,應(yīng)保證各樣本中含有大致相同量的RNA,因此需要對所提取的RNA進(jìn)行定量。常用的定量方法包括:分光光度法、熒光染料檢測、瓊脂糖凝膠電泳、毛細(xì)管凝膠電泳和3':5
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超敏一步巢式Taqman qPCR熒光核酸檢測技術(shù)的機(jī)理及應(yīng)用優(yōu)勢
2021-3-23
巢式PCR具有很高的靈敏度和特異性,但傳統(tǒng)的巢式PCR采用兩對引物,通過兩輪PCR,進(jìn)行目標(biāo)產(chǎn)物的擴(kuò)增。這種操作的不便性,使得其高靈敏度的特性難以應(yīng)用到快速檢測和臨床診斷中。在單管巢式PCR的
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無需ROX校準(zhǔn)的Azure Cielo™ Real-Time PCR光學(xué)系統(tǒng)的應(yīng)用
2021-1-29
ROX是一種廣泛使用的惰性熒光染料,通常添加到qPCR反應(yīng)液中以校正熒光信號。然而,隨著熒光技術(shù)在儀器中的發(fā)展,比如在Azure Cielo™實時熒光定量PCR系統(tǒng),為了標(biāo)準(zhǔn)化而單獨使用染料的步驟
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ac4C榮登Nature-RNA修飾研究大有可為
2020-10-20
RNA修飾是表觀遺傳學(xué)中調(diào)控轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)的關(guān)鍵過程,目前對m6A RNA修飾的研究已進(jìn)行的如火如荼,但除了m6A以外仍有多種RNA修飾類型參與調(diào)控轉(zhuǎn)錄后的基因表達(dá),其中包括m1A、m5C、m7G、2&rsquo
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