上海賽達藥業(yè)：關于血清使用的幾點建議

1． 血清必須貯存在－20℃，如存放于4℃，請勿超過兩周。對于某些單位一次無法用完一瓶，可在無菌條件下將其40－45ml分裝于無菌50ml離心管中，由于血清解凍時體積會增加10％，必須預留此膨脹體積的空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。
2． 我公司所提供的血清一般為200ml和400ml裝量，因此我們建議您在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清：－20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再分裝，一般以50ml無菌離心管中分裝40－45ml。我們強烈建議您在溶解過程中，必須規(guī)則地將血清搖晃均勻，小心勿造成氣泡，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由－20℃放置至37℃環(huán)境下解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而產(chǎn)生沉淀。
3． 血清的滅活（heat-inactivation）一般是指56℃，30分鐘水浴加熱已完全解凍的血清。加熱過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。此處理的目的是使血清中的補體成分（complement）去活化。但是，經(jīng)過滅活處理的血清會因而造成沉淀物的顯著增多，且會影響血清的品質。所以，我公司所生產(chǎn)的細胞培養(yǎng)用牛血清不做滅活處理，由客戶自行選擇。而診斷試劑用血清在除菌過濾前均進行過滅活處理。
4． 您在使用血清的時候，勿將血清留置于37℃太久，如果在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分會因而受到破壞，影響血清的品質。
5． 我公司所提供的高融合型細胞培養(yǎng)用小牛血清和標準型細胞培養(yǎng)用小牛血清均采取100納米進口MILLIPORE濾器連續(xù)三次去除支原體的無菌過濾。若您在血清產(chǎn)品中發(fā)現(xiàn)懸浮物，除非必須去除，我們建議您將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。
6． 血清的沉淀物
6．1凝絮物：其產(chǎn)生的原因有多種，但普遍的原因是血清中的脂蛋白（lipoprotein）變形及解凍后血清中存在的纖維蛋白（fibrin）造成，這些凝絮沉淀物不會影響血清本身的品質。除非必須，如果您想減少這些沉淀物，我們建議您可用離心3000rpm，5min去除，或離心后取上清液加入培養(yǎng)基中一起除菌過濾。
6．2顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為是血清遭受污染，而將血清放置在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在37℃環(huán)境下。又會使此沉淀物增多，更會誤認為微生物的增殖，但以培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點不會影響細胞的生長。

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