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伯齊推出細(xì)胞能量代謝胞內(nèi)氧含量實時監(jiān)測解決方案

瀏覽次數(shù)：5296　發(fā)布日期：2016-7-4　 來源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明出處
 
細(xì)胞內(nèi)氧含量實時監(jiān)測解決方案
 
    近來，越來越多的研究結(jié)果揭示，細(xì)胞內(nèi)氧含量水平對細(xì)胞的生理狀態(tài)，信號傳導(dǎo)以及細(xì)胞對藥物處理的應(yīng)激反應(yīng)有顯著的影響(1,2,3)。目前已知影響胞內(nèi)氧含量的因素包括細(xì)胞組織類型，環(huán)境氧濃度，細(xì)胞密度以及細(xì)胞代謝速率等因素。
如圖1 A所示，不同組織部位的氧含量明顯不同。然而，目前大多數(shù)的體外細(xì)胞培養(yǎng)實驗，仍然暴露于環(huán)境氧條件下，忽視了大氣環(huán)境和培養(yǎng)基之間以及培養(yǎng)基和細(xì)胞胞內(nèi)環(huán)境之間的的氧含量差異，無形中也嚴(yán)重影響到實驗研究的準(zhǔn)確性和靈活性。
圖 1 A ：不同組織細(xì)胞胞內(nèi)氧壓力。B 和 C：用大氣控制模塊將環(huán)境氧調(diào)節(jié)至～6%過程中，體外培養(yǎng)細(xì)胞胞內(nèi)氧含量的變化
 
 
    針對這一棘手問題，BMG Labtech公司推出了采用CLARIOstar和Omega系列多功能酶標(biāo)儀，結(jié)合BMG精密的大氣控制單元和Luxcel Biosciences公司獨有的胞內(nèi)氧檢測試劑盒MitoXpress Intra，實現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)氧含量實時監(jiān)測的解決方案。其中，大氣控制單元用來精確調(diào)控環(huán)境中CO2和 O2的含量，進(jìn)而創(chuàng)造正常生理條件或低氧條件。MitoXpress Intra可逆性氧淬滅探針，可以進(jìn)入二維或三位培養(yǎng)（如Matrigel，RAFTTM，microtissues，Alvetex和Mimetix等）的組織細(xì)胞內(nèi)，實時監(jiān)測胞內(nèi)的氧含量。利用該方案可以在圖1B和C中輕易地監(jiān)測到，在環(huán)境氧條件下，代謝緩慢的細(xì)胞胞內(nèi)氧含量為～14%，而代謝活躍的細(xì)胞胞內(nèi)氧含量則為～7%。
當(dāng)用大氣控制單元調(diào)節(jié)環(huán)境氧含量為～6%時，代謝緩慢的細(xì)胞胞內(nèi)氧含量減少至～4.5% ，代謝活躍的細(xì)胞胞內(nèi)氧含量近似缺氧環(huán)境。同樣隨著環(huán)境氧濃度的變化，三維組織培養(yǎng)的肝細(xì)胞胞內(nèi)氧含量也會敏感地隨之降低，并且當(dāng)環(huán)境氧濃度減低至低氧條件時（～5%），肝細(xì)胞胞內(nèi)氧含量已經(jīng)處于缺氧環(huán)境（圖2）。
 
圖 2: 不同環(huán)境氧條件下3D RAFTTM structures HepG2細(xì)胞內(nèi)氧含量
 
    此外，結(jié)合CLARIOstar連續(xù)依次加藥的功能，胞內(nèi)氧實時監(jiān)測還可及時地評估不同藥物對相同細(xì)胞代謝功能的影響。如圖3所示，向環(huán)境氧條件下的三維培養(yǎng)HepG2細(xì)胞，添加解偶聯(lián)劑FCCP之后，HepG2胞內(nèi)氧含量立刻開始下降。而在其后添加電子傳遞鏈抑制劑Antim-ycin A（圖中未標(biāo)出）后，HepG2胞內(nèi)氧含量又恢復(fù)至環(huán)境氧條件下的胞內(nèi)氧濃度。

圖 3: 實時監(jiān)測不同藥物對相同3D
RAFTTM structures HepG2 細(xì)胞呼吸代謝的影響

 
    因此，實時監(jiān)測胞內(nèi)氧含量將對準(zhǔn)確地反應(yīng)不同條件下的細(xì)胞生理狀態(tài)，信號傳導(dǎo)過程以及細(xì)胞對藥物處理的應(yīng)激反應(yīng)等研究問題帶來極大地應(yīng)用價值。
 
參考文獻(xiàn)：
1. Chapple SJ. et al. (2015) Free Radic Biol Med. [Epub].
2. Zhdanov AV. et al. (2015) Exp Cell Res. (330) 13–28.
3. Potter M. et al. (2016) Adv Exp Med Bio. (876) 257-263. 
4. Hynes and Carey (2015) Mitochondrial Medicine 1, (1264).
 

    愛爾蘭LUXCEL試劑廠商與德國BMG LABTECH酶標(biāo)儀廠商從去年開始攜手合作，共同研發(fā)推動多指標(biāo)細(xì)胞能量代謝研究。LUXCEL細(xì)胞能量代謝試劑搭配德國BMG LABTECH的酶標(biāo)儀和其強大的數(shù)據(jù)處理軟件MARS，僅需簡單的3步操作，您就可以輕松地獲得細(xì)胞能量代謝分析數(shù)據(jù)結(jié)果！讓繁瑣的實驗操作和數(shù)據(jù)處理從此變浮云！

    LUXCEL試劑的研發(fā)是在BMG LABTECH的酶標(biāo)儀上進(jìn)行的，因為BMG酶標(biāo)儀有非常好的靈敏度和穩(wěn)定性。LUXCEL推薦使用BMG LABTECH的CLARIOstar和FLUOstar Omega多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行細(xì)胞能量代謝研究。因為CLARIOstar具有超級光柵LVF技術(shù)，比現(xiàn)有市場的傳統(tǒng)四光柵靈敏度更高，突破了傳統(tǒng)濾光片酶標(biāo)儀不能進(jìn)行熒光全光譜掃描以及傳統(tǒng)光柵型酶標(biāo)儀帶寬窄及帶寬不靈活的各種缺點。而FLUOstar Omega在保證高靈敏度的同時讓您的預(yù)算更游刃有余。兩款酶標(biāo)儀的型號都可選配大氣控制模塊，使用戶可以進(jìn)一步研究低氧，缺氧環(huán)境下的細(xì)胞代謝情況。

 
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