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在研磨幼豬內(nèi)臟組織實(shí)驗(yàn)中 你有遇到過(guò)這些問(wèn)題嗎?

瀏覽次數(shù):972 發(fā)布日期:2016-10-21  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

在研磨幼豬內(nèi)臟組織實(shí)驗(yàn)中 你有遇到過(guò)這些問(wèn)題嗎? 

 
本期昊諾斯第14期組織研磨和樣品處理分享、討論,我們給大家分享的內(nèi)容是——研磨幼豬內(nèi)臟組織測(cè)藥物代謝,邀請(qǐng)到了昊諾斯銷售經(jīng)理給大家做分享。
 
那接下來(lái),就讓我們先睹為快,看看這個(gè)案例的情況。
 
實(shí)驗(yàn)前樣品準(zhǔn)備
 
實(shí)驗(yàn):研磨幼豬內(nèi)臟組織測(cè)藥物代謝
試驗(yàn)樣品:幼豬心、肝、脾、肺、腎、腦6個(gè)部位的組織
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/STRONG>藥物代謝測(cè)定分析
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、取出置于冰箱內(nèi)的幼豬心、肝、脾、肺、腎、腦組織樣品略解凍,每個(gè)部位的樣品各取2份為一組對(duì)照,切成小塊后分別置于離心管內(nèi),編號(hào)并放進(jìn)冰盒中;
2、每次研磨將以對(duì)照組為單位進(jìn)行。以脾臟研磨為例:將2份脾臟組織樣品分別轉(zhuǎn)移至2個(gè)鼎昊源TL1000小型組織研磨儀配套的硬質(zhì)塑料研磨管中,每管各加入不銹鋼珠1顆,其中一管加入磷酸鹽組織液,另一管加入醋酸銨組織液,蓋好管蓋,安裝上機(jī);
3、采用自動(dòng)間歇研磨方法,組織研磨儀轉(zhuǎn)速適當(dāng),設(shè)置循環(huán),組織研磨儀研磨完成后用吸管轉(zhuǎn)移回之前對(duì)應(yīng)編號(hào)的離心管中;
4、由于各內(nèi)臟組織樣品的韌性不同,針對(duì)肝和腦組織的研磨,采用僅一次研磨的方法,使研磨時(shí)間被縮短,但組織研磨儀研磨效果仍然很好;針對(duì)心臟組織的研磨,采用了鼎昊源TL1000小型組織研磨儀配套的不銹鋼研磨罐,使研磨更加勻細(xì)。
 
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
 
A.磷酸鹽組織液
 
 
B.醋酸銨組織液
 
 
C.最終結(jié)果圖

 
此外,我們的分享嘉賓還跟群內(nèi)用戶進(jìn)行了激烈的分享、討論,讓我們一同來(lái)看看擦出了怎樣的火花吧!
 
昊諾斯嘉賓:大家好,今天本次討論的主講在上海展會(huì),所以由我來(lái)代述一下。這次的實(shí)驗(yàn)樣品還是內(nèi)臟組織,但實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖浅煞值臏y(cè)定。
 
 
昊諾斯嘉賓:我記得以前曾經(jīng)在討論會(huì)中有相似的案例,說(shuō)明目前做這類研究的實(shí)驗(yàn)室還是挺多的。做這類實(shí)驗(yàn)的一個(gè)共同的特點(diǎn)就是樣品都比較新鮮,這和做生物大分子的實(shí)驗(yàn)有所不同,樣品基本保持了原有的性狀,這樣有利于代謝產(chǎn)物的收集和測(cè)定的準(zhǔn)確。
 
昊諾斯嘉賓如果看過(guò)實(shí)驗(yàn)報(bào)告的老師會(huì)發(fā)現(xiàn),在這6種組織中心肺的研磨是稍微費(fèi)力一些的,其他組織都是容易處理的,但是這類實(shí)驗(yàn)雖然破碎樣品難度不大,但要求的單個(gè)樣本量卻比較大,這是為了提取到足夠的產(chǎn)物,所以我們?cè)谶@個(gè)實(shí)驗(yàn)中,用的都是5ml的研磨管,在處理量上完全滿足實(shí)驗(yàn)要求。
 
昊諾斯嘉賓正如報(bào)告中所述,這次實(shí)驗(yàn)用了2種緩沖液,磷酸鹽的效果好于醋酸鹽的,這可能是跟酸性強(qiáng)弱有關(guān),但兩種溶液測(cè)定成分都是沒(méi)有問(wèn)題的。
 
用戶:只是負(fù)20℃夠嗎?發(fā)現(xiàn)肌肉類很少用液氮的。
 
昊諾斯嘉賓剛才提到了,這次實(shí)驗(yàn)的樣本基本是新鮮的,-20℃只是暫時(shí)保存,就和超市里生鮮區(qū)的肉差不多。
 
用戶:也就是說(shuō)不用凍硬?這倒是我第一次見(jiàn)。
 
昊諾斯嘉賓:我們和很多老師討論過(guò),動(dòng)物類的樣本,特別是新鮮的,凍液氮會(huì)適得其反。
 
用戶哦,我只做過(guò)植物的。
 
昊諾斯嘉賓因?yàn)槔锩娴乃痔嗔,液氮無(wú)法使其徹底脫水,反而會(huì)結(jié)很硬的冰。
 
用戶嗯,植物會(huì)薄很多,表面積比體積比大,去水快。
 
昊諾斯嘉賓是,也分情況。前兩天碰到一個(gè)做蘋果的老師,他也是凍液氮,結(jié)果一小塊蘋果凍得跟鋼珠似得,反而也不好研磨了,后來(lái)干脆直接磨,磨好了。
 
用戶應(yīng)該切片,而不是塊,或許好些。
 
昊諾斯嘉賓對(duì),但這個(gè)老師的樣品是從-80℃冰箱里直接拿出來(lái)的,采集時(shí)切的小塊,他也是怕溫度變化影響結(jié)果,所以才又沒(méi)切又加液氮。
 
用戶可能是怕氧化。
 
昊諾斯嘉賓他做的是DNA,只要不太高的溫度都沒(méi)問(wèn)題,而且這種從-80℃冰箱里拿出來(lái)的樣本,目前最多采用的是加緩沖液研磨,特別是動(dòng)物樣品。
 
用戶加緩沖液是為了保護(hù)?
 
昊諾斯嘉賓一來(lái)有助于保護(hù)樣本,二來(lái)是幫助化凍,還有的好處就是有利于均勻。
 
用戶:嗯,液體容易混合均勻。
 
用戶這兩種緩沖液有何區(qū)別?
 
昊諾斯嘉賓應(yīng)該就是成分不同,作用一致。
 
昊諾斯嘉賓這次的實(shí)驗(yàn)也是這個(gè)老師摸索條件的一個(gè)過(guò)程,總結(jié)起來(lái),我認(rèn)為本次實(shí)驗(yàn)最主要的就是使用的研磨管合適。
 
用戶加液體積比也是摸索嗎?
 
昊諾斯嘉賓這個(gè)是實(shí)驗(yàn)方法固定的,按比例來(lái)的,就是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)的樣本體積是固定的,所以才知道用多大的管子,咱們之前說(shuō)過(guò),研磨的加樣體積也是有要求的。
 
用戶嗯,太稠了轉(zhuǎn)不起來(lái)。
 
昊諾斯嘉賓太多了阻力又大,所以本次實(shí)驗(yàn)的體積剛好在可控范圍之內(nèi),而且大管子的研磨力度大,像大多數(shù)樣本本身就比較好磨,用大管子就可以縮短時(shí)間,效率更高。
 
最后,讓我們共同期待第13期“組織研磨和樣品處理分享、討論”活動(dòng)吧!下期,我們不見(jiàn)不散!
 
溫馨提示:
我們的“組織研磨和樣品處理分享、討論”活動(dòng)是在【昊諾斯鼎昊源組織研磨分享】微信群內(nèi)開展的!如果您也想?yún)⑴c我們的活動(dòng),那么就掃描下方二維碼,加群主請(qǐng)微信,由群主拉您進(jìn)群!
 
此外,本群的目的是希望可以給大家提供一個(gè)樣品處理問(wèn)題的交流平臺(tái),有什么相關(guān)問(wèn)題在群里能夠分享和提問(wèn)答疑……另外我們還能通過(guò)這個(gè)平臺(tái)連接用戶使用人員和工廠研發(fā)人員,看看在這些討論過(guò)程中是否會(huì)碰撞出火花來(lái),以為實(shí)驗(yàn)室手工的樣品處理做出更多更好的自動(dòng)化的輔助工具或替代儀器備來(lái),更可以為完善我們現(xiàn)有產(chǎn)品的設(shè)計(jì)打開思路提出建議……
 
點(diǎn)擊組織研磨儀,可了解更多產(chǎn)品信息!
 
 
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聯(lián)系電話:010-64842431/64838766/64838775-237
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