講座：核酸標(biāo)準(zhǔn)物定量檢測的數(shù)字PCR方法轉(zhuǎn)換

課程內(nèi)容

數(shù)字PCR是第三代PCR技術(shù)，可量化低豐度DNA拷貝數(shù)，實(shí)現(xiàn)高精度和真實(shí)地對DNA拷貝數(shù)進(jìn)行絕對定量。此外，在不同樣本的DNA提取過程中，數(shù)字PCR被認(rèn)為對可以提取的PCR抑制物的耐受度高于熒光定量PCR。在實(shí)驗(yàn)室建立數(shù)字PCR檢測方案時，需要考慮不同的方面，其包括(但不限于)確保有效區(qū)分陽性和陰性的分區(qū)，調(diào)整所使用的PCR預(yù)混液的類型，優(yōu)化引物特異性，引物和探針濃度比，以及檢測性能評估。此講座對上述問題和其他方面提供了信息參考，并為將現(xiàn)有的熒光定量PCR方法轉(zhuǎn)換為數(shù)字PCR方法提供了建議。

上面提到了標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)需要在核酸方面進(jìn)行檢測，還有許多生物制藥需要在下游蛋白層面進(jìn)行研究，例如：宿主蛋白（HCP）構(gòu)成生物制品生產(chǎn)工藝中雜質(zhì)的主要組成，其殘留可能會引起人體內(nèi)引發(fā)免疫反應(yīng)，在生物制品中需要對HCP進(jìn)行檢測，本報告將對HCP的來源，質(zhì)控和檢測方法等給大家做介紹，同時在細(xì)胞治療研發(fā)中需要對藥效進(jìn)行體外評價，對于基因修飾/改造的細(xì)胞需要對目的基因存在，表達(dá)和表達(dá)產(chǎn)物的生物學(xué)作用進(jìn)行必要的研究，成像系統(tǒng)都在其中發(fā)揮著重要作用。

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