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PAG2015:Blue Pippin在咖啡基因組測(cè)序中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):2579 發(fā)布日期:2015-3-5  來源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處
在2015年1月份美國圣地亞哥舉辦的植物和動(dòng)物基因組學(xué)大會(huì)(Plant and Animal Genome,PAG)上,咖啡基因組的研究成為熱點(diǎn)。來自哥倫比亞國家咖啡研究中心的科學(xué)家們提出一項(xiàng)新的計(jì)劃,鑒定分析咖啡基因組中的遺傳元件,用于幫助種植戶培育更好適應(yīng)氣候變化的新品種。
 
咖啡的產(chǎn)量最近幾年波動(dòng)很大,咖啡葉銹病在拉丁美洲流行,已造成超過10億美元的經(jīng)濟(jì)損失?茖W(xué)家們認(rèn)為,是氣候變化造成咖啡作物對(duì)蟲害和病害愈發(fā)敏感?Х妊芯恐行墓ぷ魅藛T與PacBio公司合作,使用第三代測(cè)序技術(shù)對(duì)小果咖啡卡杜拉品種(Coffea arabica cv. Caturra)進(jìn)行長(zhǎng)片段測(cè)序,已獲得60×的數(shù)據(jù),并得到組裝后的基因組序列。
 
科學(xué)家們正計(jì)劃用另一種咖啡(C. eugenioides)基因組的高質(zhì)量測(cè)序數(shù)據(jù)驗(yàn)證得到的組裝結(jié)果。C. eugenioides 的測(cè)序數(shù)據(jù)是由Rohe454和illumina公司二代測(cè)序儀共同完成的。

科學(xué)家團(tuán)隊(duì)希望這項(xiàng)工作能夠極大提高對(duì)咖啡遺傳特性和基因組的認(rèn)識(shí)和理解,培育出更有抗性和更健康的咖啡作物品種。
 
以上測(cè)序研究工作使用到了美國Sage公司的Blue Pippin長(zhǎng)片段基因組DNA回收系統(tǒng),用于測(cè)序建庫工作;蚪M測(cè)序組裝要求建庫階段拿到長(zhǎng)度均一的DNA片段,用于下一步的測(cè)序工作。每次測(cè)序?qū)嶒?yàn)要求的DNA片段長(zhǎng)度都有不同,根據(jù)模板、測(cè)序儀平臺(tái)以及具體實(shí)驗(yàn)要求等因素來確定,比如二代測(cè)序可能會(huì)要求片段長(zhǎng)度控制在180bp、270bp、400bp、600bp不等,而三代測(cè)序則會(huì)要求片段長(zhǎng)度更長(zhǎng),比如5kb、10kb、20kb等。傳統(tǒng)方法是使用切膠回收或者磁珠法回收特定大小的DNA片段,但其重復(fù)性、準(zhǔn)確性都不能充分滿足高通量測(cè)序的實(shí)驗(yàn)要求,影響實(shí)驗(yàn)效率、組裝結(jié)果,以及實(shí)驗(yàn)成本。美國Sage Science公司開發(fā)的Pippin系列全自動(dòng)核酸片段回收設(shè)備能夠有效解決這些問題,并已有大量的文獻(xiàn)驗(yàn)證。Sage公司現(xiàn)已開發(fā)出四款產(chǎn)品:Pippin Prep、Blue Pippin、Sage ELF、Pippin HT,用以滿足不同類別客戶的需求。在歐美,Pippin系列設(shè)備已逐漸成為測(cè)序?qū)嶒?yàn)室標(biāo)準(zhǔn)配置,并被illumina、Lifetech、PacificBio的測(cè)序儀生產(chǎn)廠家直接推薦。在國內(nèi),Sage設(shè)備也已開始大量裝備各級(jí)別測(cè)序?qū)嶒?yàn)室,廣受客戶歡迎。
 
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