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昊諾斯嘉賓:這次用組織研磨儀研磨樣品是比較小的昆蟲,最開始單純用鋼珠研磨效果一般,后來選擇鋼珠加玻璃珠的研磨方式,研磨效果還不錯(cuò)。
用戶:玻璃珠不會(huì)碎嗎?
昊諾斯嘉賓:不會(huì),玻璃珠也是很硬的。
昊諾斯嘉賓:當(dāng)時(shí)試過單顆鋼珠,2顆鋼珠,單純玻璃珠及1顆鋼珠配玻璃珠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)還是1顆鋼珠配玻璃珠效果最好,研磨最均勻。
用戶:鋼珠加玻璃珠挺有想法的,你試過光玻璃珠嗎?鋼珠和玻璃珠的直徑是多少?
昊諾斯嘉賓:試過,單純的玻璃珠比較輕,對(duì)于稍微有點(diǎn)硬的果蠅效果一般。
用戶:果蠅在研磨前需要做哪些處理么?
昊諾斯嘉賓:鋼珠是5mm的,玻璃珠是1mm的。
用戶:只用玻璃珠肯定質(zhì)量太輕,效果不好。
昊諾斯嘉賓:果蠅之前是培養(yǎng)在試管里面的,然后用組織研磨儀研磨之前,加入緩沖液,直接研磨。
昊諾斯嘉賓:當(dāng)時(shí)單純用鋼珠不加玻璃珠的時(shí)候,只能把樣品大致研碎,但還碎的不是很充分。
用戶:玻璃珠直徑很小,所以使得樣品研磨的更細(xì)致吧?
昊諾斯嘉賓:是的,其實(shí)以后要是遇到類似樣品也可以試下這種辦法,既有一定硬度,又比較細(xì)小的樣品可以試一下,像果蠅、線蟲,或者是藻類都可以試下。
用戶:果蠅凍干處理了嗎?
昊諾斯嘉賓:沒有,就是死的果蠅然后加入緩沖液。
用戶:處理完怎么清理?感覺挺那個(gè)的。
昊諾斯嘉賓:研磨完嗎?
用戶:嗯。
昊諾斯嘉賓:就是補(bǔ)齊緩沖液,然后低速離心取上清。
用戶:我正在磨馬尾藻。
昊諾斯嘉賓:是鮮樣還是干樣?
用戶:新鮮的,加了一個(gè)5mm鋼珠和3個(gè)3mm鋼珠。
昊諾斯嘉賓:研磨時(shí)間呢?
用戶:時(shí)間9分鐘,九次,每次1分鐘。干磨效果不佳。
昊諾斯嘉賓:您試過凍液氮后再研磨嗎?
用戶:我又加了緩沖液,再磨了次,略好些,以前試過液氮。
昊諾斯嘉賓:效果怎么樣?
用戶:想不通過液氮試試,效果一般。我現(xiàn)在加了緩沖液再磨一次。
昊諾斯嘉賓:植物樣品研磨一般是凍液氮干磨,或者加提取液濕磨。
用戶:時(shí)間還是比較長。
昊諾斯嘉賓:您緩沖液加了多少?如果緩沖液加的多的話,對(duì)鋼珠的阻力也會(huì)比較大。
用戶:200mg加400ul,我對(duì)DNA要求不高,估計(jì)還行。
昊諾斯嘉賓:您提取過DNA嗎?
用戶:你是指哪種?植物動(dòng)物微生物都弄過。
昊諾斯嘉賓:我是說研磨之后,提取過DNA嗎?效果怎么樣?
用戶:做動(dòng)物的我直接不磨,直接20mg提取。
昊諾斯嘉賓:剛才我看了下馬尾藻,跟小球藻不一樣,您試下用2顆5mm,或者2顆6mm鋼珠試下。我懷疑一顆5mm的撞擊力度可能有點(diǎn)小,試下2顆。
用戶:實(shí)踐證明,磨不碎,再試試別的。
最后,讓我們共同期待第13期“組織研磨和樣品處理分享、討論”活動(dòng)吧!下期,我們不見不散!
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