在研磨幼豬內(nèi)臟組織實驗中你有遇到過這些問題嗎？

瀏覽次數(shù)：973　發(fā)布日期：2016-10-21　來源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明出處

在研磨幼豬內(nèi)臟組織實驗中你有遇到過這些問題嗎？

本期昊諾斯第14期組織研磨和樣品處理分享、討論，我們給大家分享的內(nèi)容是——研磨幼豬內(nèi)臟組織測藥物代謝，邀請到了昊諾斯銷售經(jīng)理給大家做分享。

那接下來，就讓我們先睹為快，看看這個案例的情況。

實驗前樣品準備

實驗：研磨幼豬內(nèi)臟組織測藥物代謝

試驗樣品：幼豬心、肝、脾、肺、腎、腦6個部位的組織

實驗目的：藥物代謝測定分析

實驗步驟：

1、取出置于冰箱內(nèi)的幼豬心、肝、脾、肺、腎、腦組織樣品略解凍，每個部位的樣品各取2份為一組對照，切成小塊后分別置于離心管內(nèi)，編號并放進冰盒中；

2、每次研磨將以對照組為單位進行。以脾臟研磨為例：將2份脾臟組織樣品分別轉(zhuǎn)移至2個鼎昊源TL1000小型組織研磨儀配套的硬質(zhì)塑料研磨管中，每管各加入不銹鋼珠1顆，其中一管加入磷酸鹽組織液，另一管加入醋酸銨組織液，蓋好管蓋，安裝上機；

3、采用自動間歇研磨方法，組織研磨儀轉(zhuǎn)速適當，設置循環(huán)，組織研磨儀研磨完成后用吸管轉(zhuǎn)移回之前對應編號的離心管中；

4、由于各內(nèi)臟組織樣品的韌性不同，針對肝和腦組織的研磨，采用僅一次研磨的方法，使研磨時間被縮短，但組織研磨儀研磨效果仍然很好；針對心臟組織的研磨，采用了鼎昊源TL1000小型組織研磨儀配套的不銹鋼研磨罐，使研磨更加勻細。

實驗結果：

A.磷酸鹽組織液

B.醋酸銨組織液

C.最終結果圖

此外，我們的分享嘉賓還跟群內(nèi)用戶進行了激烈的分享、討論，讓我們一同來看看擦出了怎樣的火花吧！

昊諾斯嘉賓：大家好，今天本次討論的主講在上海展會，所以由我來代述一下。這次的實驗樣品還是內(nèi)臟組織，但實驗目的是成分的測定。

昊諾斯嘉賓：我記得以前曾經(jīng)在討論會中有相似的案例，說明目前做這類研究的實驗室還是挺多的。做這類實驗的一個共同的特點就是樣品都比較新鮮，這和做生物大分子的實驗有所不同，樣品基本保持了原有的性狀，這樣有利于代謝產(chǎn)物的收集和測定的準確。

昊諾斯嘉賓：如果看過實驗報告的老師會發(fā)現(xiàn)，在這6種組織中心肺的研磨是稍微費力一些的，其他組織都是容易處理的，但是這類實驗雖然破碎樣品難度不大，但要求的單個樣本量卻比較大，這是為了提取到足夠的產(chǎn)物，所以我們在這個實驗中，用的都是5ml的研磨管，在處理量上完全滿足實驗要求。

昊諾斯嘉賓：正如報告中所述，這次實驗用了2種緩沖液，磷酸鹽的效果好于醋酸鹽的，這可能是跟酸性強弱有關，但兩種溶液測定成分都是沒有問題的。

用戶：只是負20℃夠嗎？發(fā)現(xiàn)肌肉類很少用液氮的。

昊諾斯嘉賓：剛才提到了，這次實驗的樣本基本是新鮮的，-20℃只是暫時保存，就和超市里生鮮區(qū)的肉差不多。

用戶：也就是說不用凍硬？這倒是我第一次見。

昊諾斯嘉賓：我們和很多老師討論過，動物類的樣本，特別是新鮮的，凍液氮會適得其反。

用戶：哦，我只做過植物的。

昊諾斯嘉賓：因為里面的水分太多了，液氮無法使其徹底脫水，反而會結很硬的冰。

用戶：嗯，植物會薄很多，表面積比體積比大，去水快。

昊諾斯嘉賓：是，也分情況。前兩天碰到一個做蘋果的老師，他也是凍液氮，結果一小塊蘋果凍得跟鋼珠似得，反而也不好研磨了，后來干脆直接磨，磨好了。

用戶：應該切片，而不是塊，或許好些。

昊諾斯嘉賓：對，但這個老師的樣品是從-80℃冰箱里直接拿出來的，采集時切的小塊，他也是怕溫度變化影響結果，所以才又沒切又加液氮。

用戶：可能是怕氧化。

昊諾斯嘉賓：他做的是DNA，只要不太高的溫度都沒問題，而且這種從-80℃冰箱里拿出來的樣本，目前最多采用的是加緩沖液研磨，特別是動物樣品。

用戶：加緩沖液是為了保護？

昊諾斯嘉賓：一來有助于保護樣本，二來是幫助化凍，還有的好處就是有利于均勻。

用戶：嗯，液體容易混合均勻。

用戶：這兩種緩沖液有何區(qū)別？

昊諾斯嘉賓：應該就是成分不同，作用一致。

昊諾斯嘉賓：這次的實驗也是這個老師摸索條件的一個過程，總結起來，我認為本次實驗最主要的就是使用的研磨管合適。

用戶：加液體積比也是摸索嗎？

昊諾斯嘉賓：這個是實驗方法固定的，按比例來的，就是因為實驗的樣本體積是固定的，所以才知道用多大的管子，咱們之前說過，研磨的加樣體積也是有要求的。

用戶：嗯，太稠了轉(zhuǎn)不起來。

昊諾斯嘉賓：太多了阻力又大，所以本次實驗的體積剛好在可控范圍之內(nèi)，而且大管子的研磨力度大，像大多數(shù)樣本本身就比較好磨，用大管子就可以縮短時間，效率更高。

最后，讓我們共同期待第13期“組織研磨和樣品處理分享、討論”活動吧！下期，我們不見不散！

溫馨提示：

我們的“組織研磨和樣品處理分享、討論”活動是在【昊諾斯鼎昊源組織研磨分享】微信群內(nèi)開展的！如果您也想?yún)⑴c我們的活動，那么就掃描下方二維碼，加群主請微信，由群主拉您進群！

此外，本群的目的是希望可以給大家提供一個樣品處理問題的交流平臺，有什么相關問題在群里能夠分享和提問答疑……另外我們還能通過這個平臺連接用戶使用人員和工廠研發(fā)人員，看看在這些討論過程中是否會碰撞出火花來，以為實驗室手工的樣品處理做出更多更好的自動化的輔助工具或替代儀器備來，更可以為完善我們現(xiàn)有產(chǎn)品的設計打開思路提出建議……

點擊組織研磨儀，可了解更多產(chǎn)品信息！