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甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶產(chǎn)品及特點(diǎn):
Fpg (甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶) 也稱作 8-氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶(OGG),既有 N -端糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N -端糖基化酶活性可以切下雙鏈 DNA 上受損的嘌呤堿基,產(chǎn)生一個(gè)脫嘌呤 (AP) 位點(diǎn)。AP-裂解酶活性可以切割 AP 位點(diǎn)的 3' 或 5' 端,因此可以除去 AP 位點(diǎn),產(chǎn)生一個(gè)具有 3' 和 5' 磷酸的堿基缺口。被 Fpg 識(shí)別并切除的受損堿基包括:7,8-二羥基-8-氧代鳥嘌呤 (8-氧代鳥嘌呤) 、8-羥基腺嘌呤、fapy-鳥嘌呤、甲基-fapy-鳥嘌呤、fapy-腺嘌呤、黃曲霉毒素 B1-fapy-鳥嘌呤、5-羥基-胞嘧啶和 5-羥基尿嘧啶。
具體有下列特點(diǎn):
1. 單細(xì)胞凝膠電泳 (彗星試驗(yàn)),彗星試驗(yàn)的推薦稀釋倍數(shù),1:103~1:104
2. 堿性析出
3. 堿解旋
4. 修飾的切刻平移技術(shù)
活性單位定義
1 單位指在 10 μl 反應(yīng)體系中,37℃ 1 小時(shí),能夠切割 1 pmol 含單個(gè)與胞嘧啶配對(duì)的 8-氧代鳥嘌呤的 34 bp 寡核苷酸雙鏈所需要的酶量。
反應(yīng)條件
1X Buffer+ BSA [10 mM Bis Tris 丙烷-HCl,10 mM MgCl2 ,1 mM DTT(pH 7.0 @ 25℃) ]。加入100 μg/ml BSA。37℃ 溫育。
Buffer 成分
20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,0.5 mM EDTA,200 μg/ml BSA,50%Glycerol,pH 8.0 @ 25℃
熱失活
60℃ 10分鐘。
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;②生物膜與細(xì)胞器的研究;③細(xì)胞骨架體系的研究;④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;⑧細(xì)胞工程.
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程:細(xì)胞培養(yǎng)。
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶:XY4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐熱反轉(zhuǎn)錄酶) 5000U/10000U
XY1801 TUREscript 1st Strand cDNA (第一鏈反轉(zhuǎn)錄試劑盒) 25次/50次
XY4401 THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(第一鏈耐熱反轉(zhuǎn)錄試劑盒) 25次/50次
XY3401 TUREscript One Step RT-PCR Kit(一步法反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl
XY4501 THERMOscript One Step RT-PCR Kit(一步法耐熱反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl
XY4801 miRNA cDNA 第一鏈合成試劑盒 25次
XY4901 miRNA 熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 50次×50μl
XY2001 長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增試劑盒 100次/500次
XY2101 高保真PCR擴(kuò)增試劑盒 100次/500次
XY0101 pSURE-T 載體連接試劑盒 20次/60次/20次(帶T4ligase)/60次(帶T4ligase)
XY0201 pSURE -T Simple 載體連接試劑盒 20次/60次/20次(帶T4ligase)/60次(帶T4ligase)