尿嘧啶切刻酶

尿嘧啶切刻酶產(chǎn)品及特點(diǎn)：

本產(chǎn)品在尿嘧啶位置產(chǎn)生一個單核苷酸缺口，它是尿嘧啶 DNA 糖基化酶（UDG）和 DNA 糖基化酶-裂解酶 Endo Ⅷ 的混合物。UDG 催化尿嘧啶堿基的切割，形成一個脫堿基（脫嘧啶）位點(diǎn)，但保持磷酸二酯骨架結(jié)構(gòu)完整。Endo Ⅷ的裂解酶活力使脫堿基位點(diǎn) 3 和 5 端的磷酸二酯鍵斷裂，釋放無堿基的脫氧核糖。其反應(yīng)示意圖如下：

它具有下列特點(diǎn)：

1. PCR 產(chǎn)物的克隆

2. 在 DNA 的尿嘧啶處產(chǎn)生缺口

反應(yīng)條件

PCR 反應(yīng)緩沖液。37 ℃ 溫育。

Buffer 成分

10 mM Tris-HCl，5 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，175 mg/

ml BSA，50% Glycerol，50 mM KCl，pH 7.4 @ 25℃

單位定義

1 單位指在 10 μl 反應(yīng)體系中，37 ℃ 條件下，15 分鐘使 10 pmol 的含有單一尿嘧啶堿基的 34bp 寡核苷酸雙鏈產(chǎn)生切刻所需要的酶量。

參考文獻(xiàn)

(1) Bitinaite, J. et al. (2007) Nucleic Acids Res., doi:10.1093/NAR/GKM041.

(2) Lindhal, T. et al. (1997) J. Biol. Chem., 252, 3286–3294.

(3) Lindhal, T. (1882) Annu. Rev. Biochem., 51, 61–64.

(4) Melamede, R.J. et al. (1994) Biochemistry, 33,1255–1264.

(5) Jiang, D. et al. (1997) J. Biol. Chem., 272, 32230–32239

尿嘧啶切刻酶細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；②生物膜與細(xì)胞器的研究；③細(xì)胞骨架體系的研究；④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；⑧細(xì)胞工程.

尿嘧啶切刻酶細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些：

1.顯微技術(shù)：包括顯微觀察,顯微操作.

2細(xì)胞組分分析技術(shù)：離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).

3.細(xì)胞工程：細(xì)胞培養(yǎng)。

尿嘧啶切刻酶:XY120503    柱式藻類RNAOUT    50次
XY90704    土壤RNAOUT    50次
XY90705    柱式土壤RNAOUT    50次
XY60305    真菌RNAOUT    50次|250次
XY80804    柱式真菌RNAOUT    50次
XY80904    大提柱式真菌RNAOUT    5次
XY51102    細(xì)菌RNAOUT    100次|250次
XY80103    柱式細(xì)菌RNAOUT    50次
XY80905    大提柱式細(xì)菌RNAOUT    5次
XY3073    一管式病毒RNAOUT    50次|200次
XY71001    柱式病毒RNAOUT    50次
XY80922    96孔板病毒RNAOUT(離心法)    1次|5次
XY80104    一站式柱式miRNAOUT    50次
XY80906    一站式大提柱式miRNAOUT    5次
XY80908    一站式動物mRNAOUT    25次