人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；TJ905說明書

細(xì)胞名稱 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；TJ905說明書
形態(tài)特性 多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 TJ905體外細(xì)胞系取材于1例男性腦部頂葉膠質(zhì)瘤患者。倍增時(shí)間為41.03h，膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)、S-100蛋白、波形蛋白陽性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:4傳代，2~3天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11，12；D13S317：13；D16S539：9，11；D18S51：13，15；D19S433：15.2，16；D21S11：30；D2S1338：22，25；D3S1358：17；D5S818：11，12；D7S820：11，12；D8S1179：12，14；FGA：25；TH01：7，9.3；TPOX：8，11；vWA：16，18；
同工酶
染色體

運(yùn)輸和保存：

人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；TJ905說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；TJ905說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；TJ905說明書客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

Ankyrin B/Ankyrin brain  錨定蛋白B抗體 0.2ml
Renin  腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
LPP/LIM protein  脂肪瘤相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
Aurora B/STK-1  有絲分裂激酶B抗體 0.1ml
C1orf25  1號(hào)染色體開放閱讀框25抗體 0.2ml
Phospho-TLK1(Ser695)  磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 0.1ml
INSC  有絲分裂相關(guān)蛋白INSC抗體 0.2ml
FMRP/FMR1  脆性X智力低下蛋白抗體 0.2ml
HNF1/TCF1/HNF1A  肝細(xì)胞核因子1α抗體 0.2ml
Endo G  核酸內(nèi)切酶G抗體 0.1ml
夏天無 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
鉆山風(fēng) 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
紫金龍 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；TJ905說明書蒲公英 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
小茴香 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
熟地黃 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
人工牛黃 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
大葉紫珠 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
秦艽(小秦艽) 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
冬蟲夏草 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別