人肺癌細胞/5Fu耐藥株；A549-5Fu說明書

細胞名稱 人肺癌細胞/5Fu耐藥株；A549-5Fu說明書
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 McCoy＇s 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:3～1：8傳代；每周2~3次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體

運輸和保存：

人肺癌細胞/5Fu耐藥株；A549-5Fu說明書視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

（1）人肺癌細胞/5Fu耐藥株；A549-5Fu說明書細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細胞復蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人肺癌細胞/5Fu耐藥株；A549-5Fu說明書客戶造成細胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細胞狀態(tài)不好，未細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

SUPT16H/CDC68  染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體 0.2ml
LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta  自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 0.1ml
Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516)  磷酸化酪氨酸激酶A抗體 0.1ml
PBEF(NT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素抗體（N端） 0.1ml
CTR1/Calcitonin receptor  降鈣素受體抗體 0.1ml
phospho-CBL2(Tyr731)  磷酸化原癌蛋白CBL2抗體 0.1ml
IL-33  白介素33抗體 0.1ml
IGSF1  抑制素結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
FAM161B  FAM161B蛋白抗體 0.2ml
Talin  踝蛋白抗體 0.1ml
CACNB1  鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 0.2ml
蚜威 標準品  CAS號：23103-98-2 250mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
 甲基嘧啶磷 標準品  CAS號：29232-93-7 250mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
多氧霉素 標準品  CAS號：19396-06-6 100mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
人肺癌細胞/5Fu耐藥株；A549-5Fu說明書吡喹酮 標準品  CAS號：55268-74-1 250mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
烯丙苯噻唑 標準品  CAS號：27605-76-1 100mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
 氫化潑尼松 標準品  CAS號：50-24-8 250mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
甲基氟嘧磺隆 標準品  CAS號：86209-51-0 250mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
腐霉利 標準品  CAS號：32809-16-8 250mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
 咪酰胺 標準品  CAS號：67747-09-5 250mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：
丙溴磷 標準品  CAS號：41198-08-7 250mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：