運(yùn)輸和保存:
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱(chēng)
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 HCT-8與HRT-18是一樣的。 角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8,11;D16S539:12,13;D18S51:11,17;D19S433:14,16;D21S11:29,32.2;D2S1338:17,25;D3S1358:17;D5S818:13;D7S820:10,11.3;D8S1179:15;FGA:22;TH01:7,9.3;TPOX:8,11;vWA:18,19
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

ANKRD40 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 0.2ml
Cystatin D 胱抑素D/半胱氨酸蛋白酶抑制劑D抗體 0.2ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
IRAK1 白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 0.1ml
TRIM6/RNF89 環(huán)指蛋白89 0.2ml
phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 0.1ml
LAMR1 層粘連蛋白受體1抗體(N端) 0.1ml
Substance P Receptor/NK1R P物質(zhì)受體抗體 0.1ml
Transglutaminase 2/TGase2 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2抗體 0.2ml
TXNRD1 硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體 0.2ml
HIPK4 同源相互作用蛋白激酶4抗體 0.2ml
重樓皂甙C 英文名稱(chēng) Polyphyllin C 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
重樓皂甙E 英文名稱(chēng) Polyphyllin E 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
重樓皂甙F 英文名稱(chēng) Polyphyllin F 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
烏金甙 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]圖片石杉?jí)A甲 英文名稱(chēng) Huperzine-A 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
獐牙菜甙 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
豆腐果甙 英文名稱(chēng) Helicid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
告達(dá)亭甙元 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
川陳皮素 英文名稱(chēng) Nobiletin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
青陽(yáng)參甙元A 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]圖片客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);