BCIP/NBT免疫組織化學(xué)顯色試劑盒

特別提示：包括BCIP/NBT免疫組織化學(xué)顯色試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：BCIP/NBT免疫組織化學(xué)顯色試劑盒
英文名稱：BCIP/NBT Immunohistochemistry Color Development Kit
產(chǎn)品貨號：GS4973
產(chǎn)品規(guī)格：100次|500次|1000次

儲存條件：冷藏（2-8℃）

概述

BCIP/NBT是堿性磷酸酶的常用底物，在堿性磷酸酶的催化下，BCIP會被分解產(chǎn)生強反應(yīng)性的產(chǎn)物，該產(chǎn)物與NBT發(fā)生反應(yīng)，形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色化合物。在堿性磷酸酶催化下，在組織切片上結(jié)合了堿性磷酸酶偶聯(lián)物的地方產(chǎn)生深藍(lán)色沉淀，可根據(jù)顏色反應(yīng)來確定目的蛋白的位置及表達情況。

應(yīng)用

該試劑盒可用于堿性磷酸酶系統(tǒng)的免疫組化、原位雜交等實驗的酶促顯色。

組份

BCIP溶液(20X)；NBT溶液(20X)；堿性磷酸酶顯色緩沖液



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名稱：Western一抗稀釋液(WB一抗稀釋液)
貨號：YT066
規(guī)格：100mL|500mL
本品可以用于Western時一抗的稀釋和配制。使用本W(wǎng)estern一抗稀釋液稀釋和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于六個月，可以反復(fù)多次用于Western，節(jié)約您寶貴的抗體。按照每個一抗稀釋10毫升計算，一個包裝的Western一抗稀釋液可以稀釋10個或10次一抗。

注意事項：為了能使抗體可以反復(fù)多次使用，建議盡量在4℃進行一抗和蛋白膜的結(jié)合反應(yīng)，以減緩一抗的衰減速度。

儲存條件：4℃，有效期一年。

名稱：Western一抗二抗清除劑(弱堿性)
貨號：YT072
規(guī)格：250ml
本品用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測后，有時還需要檢測tubulin、actin等表達量相對穩(wěn)定的蛋白作為參照，或檢測其它蛋白進行比較。通過使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用過的膜檢測其它蛋白。和重新跑一個SDS-PAGE膠相比，不僅省時省力，而且可以消除重新上樣而帶來的誤差，使可比性更強。

使用Western一抗二抗去除液多次重復(fù)使用同一張膜，會導(dǎo)致蛋白信號的減弱。但是，本W(wǎng)estern一抗二抗去除液，經(jīng)過多個抗體的檢測試驗，通�？梢灾貜�(fù)利用膜3-5次。使用本試劑只需大約20-30分鐘即可實現(xiàn)蛋白膜的重復(fù)使用，然后可以進行封閉等后續(xù)的Western操作。

百奧萊博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除結(jié)合的一抗二抗的原理方面略有不同。分別依靠去垢劑、酸性、堿性、還原劑、螯合劑、鹽濃度以及一些特殊試劑等的不同組合來解除一抗二抗的結(jié)合，同時又不會導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失。

抗體清除劑選型表：
 

產(chǎn)品編號	YT071	YT072	YT073	YT074
產(chǎn)品名稱	Western一抗二抗清除劑(強堿性)	Western一抗二抗清除劑(弱堿性)	Western一抗二抗清除劑(中性)	Western一抗二抗清除劑(酸性)
產(chǎn)品包裝	250ml	250ml	250ml	250ml
pH	強堿性	弱堿性	中性	酸性
對于膜上蛋白的保留效果	好	好	好	好
對于一抗二抗的去除效果	好	好	好	好
去除一抗二抗所需時間	15-20分鐘	20-30分鐘	20-30分鐘	40-80分鐘
適用膜的類型	PVDF和NC	PVDF和NC	僅PVDF	PVDF和NC
腐蝕性	強	弱	無	弱

用于普通的Western檢測時蛋白膜上一抗二抗的去除可以任選一種去除液。如果是NC膜，即硝酸纖維素膜時，不宜選用YT071N。從時間角度考慮，強堿性、弱堿性和中性的去除液所需的時間都比較短，可以優(yōu)先考慮。從價格因素考慮，強堿性的去除液性價比最高。從安全性考慮，中性的去除液由于沒有腐蝕性而表現(xiàn)出更高的安全性。弱堿性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正確操作，并進行適當(dāng)防護，使用強堿性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
　　對于特定的抗原和抗體，很難說哪一種Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳時，可以考慮適當(dāng)延長一抗二抗去除液的孵育時間，同時確保孵育時的溫度不低于20℃。溫度過低時一抗二抗的去除效果會下降。同時也可以考慮嘗試其它的一抗二抗去除液，以摸索出最佳的適合您實驗條件的Western一抗二抗去除液。

注意事項：
1. 使用辣根過氧化物酶(HRP)，任何一次封閉(blocking)都應(yīng)當(dāng)使用5%脫脂牛奶，如果使用堿性磷酸酯酶，任何一次封閉都應(yīng)當(dāng)使用酪蛋白(casein)。
2. 為取得最佳效果，推薦使用PVDF膜。但硝酸纖維素膜也可以使用本W(wǎng)estern一抗二抗去除液。
3. 使用化學(xué)發(fā)光試劑進行的Western檢測適用本試劑。使用非化學(xué)發(fā)光試劑進行的Western檢測， 例如DAB，NBT/BCIP，不適用于本試劑。
4. 本W(wǎng)estern一抗二抗去除液有輕微腐蝕性，使用時請注意防護。

儲存條件：4℃，有效期一年。