特別提示:包括小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒
產(chǎn)品貨號:F060101
產(chǎn)品規(guī)格:96T×2
本試劑盒用于培養(yǎng)上清中小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類(可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA)。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包被微孔板,與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合,再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應(yīng),最后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止,再通過酶標(biāo)儀檢測吸光度來判斷被測單克隆抗體的類或亞類。本試劑盒具有極高的分辨率,是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。
試劑盒組成:
組分 |
含量 |
酶標(biāo)板 |
2×96孔 |
通用陽性對照 |
1.5ml |
通用陰性對照 |
1.5ml |
酶標(biāo)二抗 |
6×4ml |
20×清洗液 |
50mL |
封板膜 |
4張 |
標(biāo)本稀釋液 |
15ml |
顯色劑A |
15ml |
顯色劑B |
15ml |
反應(yīng)終止液 |
15ml |
加樣圖 |
2份 |
保存:2~8℃避光,有效期一年。
使用方法: 1.首先將試劑盒恢復(fù)室溫(大約30分),然后用純水把清洗液配成工作濃度(一份濃縮清洗液加19份純水)。 2.取出酶標(biāo)板。每個標(biāo)本需要6孔,陽性對照6孔,陰性對照6孔。多余的用自封袋保存,記得放入干燥劑。 3.將標(biāo)本檢測孔每孔先加入標(biāo)本稀釋液各50μl。然后將50μl細(xì)胞培養(yǎng)上清(或特異親和純化的抗體)再加入酶標(biāo)微孔板,每個標(biāo)本加6孔;陽性對照和陰性對照孔不加標(biāo)本稀釋液也是各加6孔每孔100μl。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。 4.棄去板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。再在每個標(biāo)本的6孔中分別加入6種酶標(biāo)二抗各100μl,通用陽性、陰性對照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。 5.吸棄板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl,換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。 6.本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果,看顯色藍(lán)的那個孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液(每孔50μl)終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測定波長,630nm參考波長雙波長測定結(jié)果,參看高值孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類(陽性對照OD一般不小于0.8,陰性對照一般不高于0.15,陽性判定標(biāo)準(zhǔn):樣品OD大于陰性O(shè)D+0.15,陰性O(shè)D低于0.05按0.05算)。
注意事項(xiàng): 1.雖然本試劑盒過期后很久還有使用價值但還是請您在有效期內(nèi)使用。 2.在檢測腹水類單抗時要稀釋到1/5萬,雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復(fù)雜,有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的F030215抗體鑒定試劑。它會給您帶來滿意的結(jié)果,同時您也可以使用抗原包被板來解決此類問題。 3.手洗板子時一定要把孔加滿,停留10秒然后棄盡,最后要拍干凈。特別是在酶標(biāo)二抗溫育后洗板時一定要把酶吸出而不是甩出,要吸凈。這個在手工洗板時對結(jié)果很重要。 4.一次沒用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好,隨盒存放。 5.拿放板子時不要劇烈抖動,以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯誤結(jié)果。 6.通用陽性對照數(shù)據(jù)并不一定完全一樣,僅作為試劑有效指示。 本試劑盒一般不會出現(xiàn)兩個陽性,但出現(xiàn)兩個陽性的現(xiàn)象不論在進(jìn)口或國產(chǎn)試劑中都是真實(shí)存在的,一般會一個OD很高,另一個很低但卻還能判為陽性,實(shí)驗(yàn)分析表明這種情況下以O(shè)D高值孔為準(zhǔn),出現(xiàn)這種情況有多重原因: 1.培養(yǎng)的細(xì)胞中有“飼養(yǎng)細(xì)胞”殘留; 2.抗體本身存在變異; 3.樣品為非特異親和純化的抗體或樣品是腹水; 4.上清出現(xiàn)少量污染; 5.實(shí)驗(yàn)操作粗放; 6.加錯試劑。
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AngiotensinⅠConverting Enzyme(ACE)是一種鋅金屬肽酶,對水和鹽的代謝及維持血壓起重要作用。它切除血管緊張素Ⅰ的 C 端二肽,產(chǎn)生具有升壓活性的血管緊張素Ⅱ。同樣的機(jī)制滅活緩激肽(brandykinin),此外還通過類似的機(jī)制在免疫、生育、神經(jīng)調(diào)節(jié)方面發(fā)揮作用?扇苄 ACE 來源于膜型 ACE 存在于血、羊水、腦脊液等多種體液。
檢測指標(biāo):ACE;CD143
檢測范圍:93.8pg/ml~6ng/ml
特異性:系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無交叉反應(yīng)
敏感性:<10pg/ml
產(chǎn)品組成:
組分 |
規(guī)格 |
數(shù)量 |
預(yù)包被抗小鼠ACE抗體的96孔板 |
96T |
1板 |
重組小鼠ACE標(biāo)準(zhǔn)品(凍干) |
10ng/管 |
2管 |
生物素標(biāo)記抗小鼠ACE(100X) |
130μl |
1管 |
親和素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)(100X) |
130μl |
1管 |
樣品稀釋液 |
30ml |
1瓶 |
抗體稀釋液 |
12ml |
1瓶 |
ABC稀釋液 |
12ml |
1瓶 |
TMB顯色液 |
10ml |
1瓶 |
TMB終止液 |
10ml |
1瓶 |
洗滌緩沖液(25X) |
20ml |
1瓶 |
封板膜 |
|
4張 |
儲存條件:2-8℃(頻繁使用時),-20℃(長時間不用時)
有效期:6個月(4℃);12個月(-20℃)
參考標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù):(取自某一批次質(zhì)檢數(shù)據(jù),僅供參考,用戶需要自己建立標(biāo)準(zhǔn)曲線)
濃度(pg/ml) |
0 |
93.8 |
187.5 |
375 |
750 |
1500 |
3000 |
6000 |
OD值 |
0.084 |
0.128 |
0.178 |
0.253 |
0.444 |
0.658 |
1.511 |
2.327 |

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