特別提示:包括雙顯色抗兔IgG免疫組化試劑盒(POD和FITC)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:雙顯色抗兔IgG免疫組化試劑盒(POD和FITC)
英文名稱:Double chromogenic Immunofluorescence kit for rabbit IgG(FITC&POD)
產(chǎn)品貨號:ZN2940
產(chǎn)品規(guī)格:1ml|2ml|5ml
本試劑盒適于一抗來源為兔的抗體,是專為免疫組化和其他免疫檢測而設(shè)計(jì)的。鏈霉親和素同親和素一樣,對生物素分子有極高的親和力,是一般抗原抗體親和力的一百萬倍,兼具高敏感性,低背景和操作簡便的優(yōu)點(diǎn)。免疫組化雙顯色試劑盒采用熒光素 FITC 及過氧化物酶 POD 標(biāo)記的鏈酶親和素(SABC-FITC+SABC-POD)。FITC 在 490-495nm 激發(fā),在 520-530nm 發(fā)射熒光,在熒光顯微鏡下呈明亮黃綠色。SABC-POD 在加入顯色底物 DAB 顯示后,染色呈棕黃色。用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,可在同一張切片上用兩套顯示系統(tǒng)觀察。
試劑盒組成:
組分 |
規(guī)格 |
正常山羊血清封閉液(稀釋比1:10) |
1ml/2ml/5ml |
生物素化山羊抗兔IgG(參考效價(jià)1:100) |
0.1ml/0.2ml/0.5ml |
SABC-FITC(參考效價(jià)1:100) |
0.1ml/0.2ml/0.5ml |
SABC-POD(參考效價(jià)1:100) |
0.1ml/0.2ml/0.5ml |
另附有四個(gè)滴瓶可供稀釋試劑用。
保存條件:4℃可保存一年,應(yīng)避免冷凍。
石蠟片染色步驟:
1. 石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水。
2. 3%H2O2去離子水室溫孵育5-10分鐘,以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性,PBS沖洗,5分鐘×3次。
3. 根據(jù)需要選擇抗原修復(fù)方式及強(qiáng)度?蔁嵝迯(fù)、酶修復(fù)或不修復(fù)。
4. 封閉:滴加用稀釋后的正常山羊血清封閉液(稀釋比1:10),37℃孵育30分鐘,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(兔IgG),37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。PBS沖洗,5分鐘×3次。
6. 滴加生物素化山羊抗兔IgG,37℃孵育30分鐘。PBS 沖洗,5分鐘×3次。
7. 滴加SABC-FITC(參考效價(jià)1:100)或SABC-POD(參考效價(jià)1:100),37℃孵育30分鐘。PBS沖洗,5分鐘×3次。
8. 顯色液顯色,鏡下控制反應(yīng)時(shí)間。顯色劑可選DAB(ZN1968)。自來水充分沖洗。
9. 根據(jù)需要進(jìn)行蘇木素(ZN1971)復(fù)染,染色時(shí)間為0.5-2分鐘。選用中性樹膠,水溶性封片劑(ZN2946)或抗熒光衰減封片劑(ZN1974)封片。
10. 結(jié)果觀察。熒光顯微鏡下有黃綠色顆粒者為陽性染色。普通光學(xué)顯微鏡下有棕黃色顆粒者為陽性染色。
建議:
1. 熱修復(fù)可選用枸櫞酸鹽緩沖液(ZN1955)、EDTA抗原修復(fù)液(ZN1951)、PBS緩沖液、TBS緩沖液(ZN1953)等作為抗原修復(fù)液。
2. 酶修復(fù)可選用復(fù)合修復(fù)液(ZN1952)、抗原修復(fù)液Ⅰ(ZN1954,與熱修復(fù)配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化組織。
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