特別提示:包括Verhoeff蘇木精染色液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:Verhoeff蘇木精染色液
產(chǎn)品貨號(hào):BTN160281
產(chǎn)品規(guī)格:250mL
根據(jù)您的關(guān)注的
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名稱:網(wǎng)狀纖維染液
貨號(hào):SNM340
規(guī)格:50ml×6|20ml×6|10ml×6
名稱:幽門螺旋桿菌染色液
貨號(hào):SNM356
規(guī)格:500ml×3|250ml×1;500ml×1|30ml×1;60ml×1
名稱:中性酯酶染液
貨號(hào):SNM370
規(guī)格:5ml×4
名稱:神經(jīng)元示蹤劑—熒光金
貨號(hào):KFS136
規(guī)格:1mg
名稱:細(xì)胞膜橙紅色熒光探針(DiI)
貨號(hào):KFS151
規(guī)格:10mg
長(zhǎng)鏈二烷基羰花青化合物,特別是Dil(分子量933.88),廣泛應(yīng)用于固定和非固定的組織與細(xì)胞中,進(jìn)行順行或逆行的神經(jīng)示蹤分析。
Dil 不會(huì)影響細(xì)胞的活力、生長(zhǎng)以及基本生理特性。Dil 標(biāo)記運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,可在培養(yǎng)基條件下持續(xù)跟蹤長(zhǎng)達(dá)四周,在體內(nèi)長(zhǎng)達(dá)一年。染料通過在質(zhì)膜中的緩慢橫向擴(kuò)散均勻標(biāo)記神經(jīng)元,0.2~0.6mm/每天/固定標(biāo)本,在活體組織里,可以達(dá)到6mm/每天。經(jīng)過醛固定的組織,Dil 的擴(kuò)增可以持續(xù)長(zhǎng)達(dá)1~2 年。一般情況下未標(biāo)記的染料不會(huì)向非標(biāo)記的細(xì)胞轉(zhuǎn)移,除非質(zhì)膜被破壞,比如切片部位。
儲(chǔ)存:-20℃,避光,有效期12個(gè)月。
名稱:Propidium Iodide染色液(PI,碘化丙啶)
貨號(hào):HR8318
規(guī)格:100T
PI染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測(cè)或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Propidium Iodide是一種DNA 結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為488nm和630nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無膜通透性,不能透過活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光,晚期凋亡細(xì)胞紅光加強(qiáng),壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。也可采用流式細(xì)胞儀利用細(xì)胞形態(tài)上的改變影響它們的光散射特性改變進(jìn)行分析,還可與RNase A結(jié)合進(jìn)行細(xì)胞周期分析。
儲(chǔ)存條件:4℃避光保存。長(zhǎng)期保存-20℃避光保存。
有效期:六個(gè)月。
注意事項(xiàng):
●本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
● Propidium iodide是光敏物質(zhì),請(qǐng)注意避光。
● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
● 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
● 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
使用方法:
使用注意事項(xiàng):
●本染色液用于細(xì)胞染色分析,也可用于石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞涂片的檢測(cè)。石蠟切片用常規(guī)方法脫蠟、分化、冰凍切片用冰丙酮固定后檢測(cè)。以下以培養(yǎng)細(xì)胞的熒光顯微鏡檢測(cè)為例,細(xì)胞染色可用預(yù)冷的70%的乙醇固定,4℃,1-2小時(shí),也可不固定,其他方法請(qǐng)參閱相關(guān)資料。
● 細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
●染色后請(qǐng)盡快檢測(cè)。
●染色時(shí)間根據(jù)不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整。
● PI有毒,操作時(shí)要戴上手套。
● 流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí),其DNA可染性降低被認(rèn)為是凋亡細(xì)胞的標(biāo)志之一,但這種DNA可染性降低也可能是因?yàn)镈NA含量的降低,或者是因?yàn)镈NA 結(jié)構(gòu)的改變使其與染料結(jié)合的能力發(fā)生改變所致。在分析結(jié)果時(shí)應(yīng)該注意。
熒光顯微鏡觀察
1.收集細(xì)胞,PBS洗滌細(xì)胞一次,2000rpm離心5分鐘,用PBS重懸細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度約為106個(gè)/ml;
2.取100μl細(xì)胞懸液,加入2-10μl PI染液,輕輕混勻;
3.4℃避光放置5min后,滴加于載玻片上,加蓋玻片;
4.熒光顯微鏡檢測(cè)。
流式檢測(cè):
1.收集細(xì)胞,PBS洗滌細(xì)胞一次,2000rpm離心5分鐘,用PBS重懸細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度約為106個(gè)/ml;
2.500μl細(xì)胞懸液中加入5μl PI染液;
3.4℃避光放置30min;
4.流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
結(jié)果分析:
置于熒光顯微鏡下用488nm 激發(fā)光觀察結(jié)果:正常細(xì)胞不能著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光,晚期凋亡細(xì)胞紅光加強(qiáng),壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。
流式檢測(cè)用氬離子激發(fā)熒光,激光光波波長(zhǎng)為 488nm,發(fā)射光波波長(zhǎng)大于630nm,產(chǎn)生紅色熒光分析PI熒光強(qiáng)度的直方圖也可分析前散射光對(duì)側(cè)散射光的散點(diǎn)圖。在前散射光對(duì)側(cè)散射光的散點(diǎn)圖或地形圖上,凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞相比,前散射光降低,而側(cè)散射光可高可低,與細(xì)胞的類型有關(guān);在分析PI熒光的直方圖時(shí),先用門技術(shù)排除成雙或聚集的細(xì)胞以及發(fā)微弱熒光的細(xì)胞碎片,在PI熒光的直方圖上,凋亡細(xì)胞在G1/G0 期前出現(xiàn)一亞二倍體峰。如以G1/G0 期所在位置的熒光強(qiáng)度為1.0,則一個(gè)典型的凋亡細(xì)胞樣本其亞二倍體峰的熒光強(qiáng)度為0.45,可用雞和鮭魚的紅細(xì)胞的PI熒光強(qiáng)度做參照標(biāo)準(zhǔn),兩者分別為0.35和0.7,可以確保在兩者之間的不是細(xì)胞碎片而是完整的細(xì)胞。
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關(guān)注
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