MspA1I限制性內(nèi)切酶

特別提示：包括MspA1I限制性內(nèi)切酶在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：MspA1I限制性內(nèi)切酶
英文名稱：MspA1I Restriction Endonuclease
產(chǎn)品貨號(hào)：SV0497
產(chǎn)品規(guī)格：2500U|500U|250U

在不同反應(yīng)緩沖液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重組酶、省時(shí)酶。
反應(yīng)條件:
CutSmart 緩沖液，37℃。
熱失活:65℃ 20 分鐘。
濃度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
對(duì)哺乳動(dòng)物基因組DNA CpG甲基化敏感。

根據(jù)您的關(guān)注的MspA1I限制性內(nèi)切酶，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：



名稱：Klenow片段(3′→5′exo-)
貨號(hào)：BTN131235
規(guī)格：200U
Klenow片段是大腸桿菌DNA聚合酶I的蛋白水解產(chǎn)物。它保留了DNA聚合酶活性，具有3′→5′外切酶活性，但不具有5′→3′外切核酸酶活性�？梢栽贒NA模板和引物存在的條件下，選擇性地催化底物dNTP沿5′→3′方向合成與模板互補(bǔ)的DNA。本產(chǎn)品是重組表達(dá)得到。

產(chǎn)品用途：
1．雙鏈DNA 5′突出末端的平滑化。
2．用隨機(jī)引物制備探針。
3．隨機(jī)引物標(biāo)記法。
4．寡核苷酸定向誘變中雙鏈DNA的合成。
5．雙脫氧法DNA序列測(cè)定(Sanger法)。

產(chǎn)品組成：

成分	規(guī)格
Klenow片段(5U/μL)	20μl
10×Klenow Fragment Buffer	1ml
說明書	1份

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

活性定義：以合成的Poly d(A-T)DNA為模板/引物，在37℃、pH7.4的條件下，30分鐘內(nèi)使10nmol的全核苷酸摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位。

使用舉例：(隨機(jī)引物的同位素標(biāo)記反應(yīng))
1．在微量離心管中配制下列反應(yīng)液

成份	用量
模板DNA	25ng
隨機(jī)引物(6-9mer)(1nmol/μl)	2μL
補(bǔ)超純水到	14μL

2．95℃保溫3分鐘。然后冰中急冷5分鐘。
3．加入2.5μl 10×Klenow Fragment Buffer。
4．加入2.5μl dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
5．加入5μl 111TBq/mmol[α-32P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq，50μCi)
6．加入1μl本產(chǎn)品，反應(yīng)液共25μl。
7．37℃反應(yīng)3小時(shí)。
8．65℃加熱5分鐘。
 反應(yīng)液可直接作為探針使用。如有必要，可以通過用我司柱式探針純化試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記的dCTP。

注意事項(xiàng)：
1．本酶有高度穩(wěn)定性，稀釋時(shí)不失活，但劇烈攪拌會(huì)失活。
2．由于不含有 5′→3′的外切核酸酶活性，因此沒有切口平移活性。
3．可用于雙鏈DNA末端以及缺口的修復(fù)。
4．與T4 DNA Polymerase相比，對(duì)模板高級(jí)結(jié)構(gòu)的抵抗性能較好。
5．由于對(duì)DNA的親和性較強(qiáng)，過量使用易發(fā)生凝集作用從而抑制反應(yīng)進(jìn)行。
6．若用于5′突出末端的修飾時(shí)，補(bǔ)平后有時(shí)會(huì)多加一個(gè)堿基。
7．與DNA Polymerase I相同，ddNTPs的摻入不受底物抑制。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
YT512	末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT酶)	500U
SV0024	AflIII限制性內(nèi)切酶	1250U|250U|125U
SV0077	AvrII限制性內(nèi)切酶	500U|100U|50U
SV0163	BsaI-HF限制性內(nèi)切酶	5KU|1KU|500U
SV0259	BstEII-HF RE-Mix限制性內(nèi)切酶	100次
SV0639	RsaI限制性內(nèi)切酶	5KU|1KU|500U
SV0701	SmaI限制性內(nèi)切酶	10KU|2KU|1KU