柱式探針純化試劑盒

特別提示：包括柱式探針純化試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：柱式探針純化試劑盒
英文名稱：Column Probe Purification Kit
產(chǎn)品貨號：BTN121122
產(chǎn)品規(guī)格：10次

本試劑盒是基于分子排阻層析原理的、專門用于純化同位素和非同位素標記的核酸探針的試劑盒。在分子排阻層析過程中，大分子(標記的核酸探針或Oligo探針)將繞過層析介質(zhì)，快速穿透出層析柱，小分子(未參入的核苷酸)將進入層析介質(zhì)中，緩慢穿透出層析柱。根據(jù)這一時間差而將兩者分開。此過程的示意圖如下：


產(chǎn)品特點：
1. 即開即用，提供純化所需要的所有溶液和介質(zhì)，不需要單獨準備每種試劑，免去用戶自己摸索條件。
2.適用于PCR 標記、隨機引物標記、切口平移和填入法標記。
3. 能去掉絕大部分的未標記物、鹽離子等小分子。
4. 足夠10次純化使用，每次可以純化50μl的標記反應(yīng)液。
5.可用于DIG、生物素、Cy3、Cy5等非同位素標記的DNA和RNA探針(由于標記分子帶非極性基團，容易進入有機相，因此這些探針不能用傳統(tǒng)的酚lǜ仿抽提-乙醇沉淀法純化)。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
Sephadex G50 介質(zhì)	15ml
0.7mL離心柱及管套	10套
TE溶液	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。

使用方法：
注意：由于非同位素標記的探針濃度一般都比較低，非常容易吸附到槍頭或離心管的表面，造成探針的損失，因此最好使用硅化的離心管和槍頭。

1. 搖晃Sephadex G50介質(zhì)至均勻，迅速轉(zhuǎn)移0.5mL 到離心柱中，套上套管(又叫收集管)。
2. 2000rpm室溫離心1分鐘，Sephadex G50介質(zhì)將壓緊在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液，再加0.5mL的搖晃后得到的Sephadex G50 介質(zhì)，2000rpm室溫離心1分鐘。
4. 經(jīng)上述步驟會得到體積約為0.5mL 壓緊后的Sephadex G50介質(zhì)。如不足，再加入少量的G50介質(zhì)離心，直到體積達到0.5mL左右。倒掉套管中的穿透液。
5.在柱子中Sephadex G50 界面的上面加入50μl TE緩沖液，套上套管，2000rpm室溫離心1分鐘，測量收集管中穿透液的體積。
6. 重復(fù)上步3-5次，直到收集管中穿透液的體積跟加入的體積一樣(50μL)。
7. 將50μl的標記探針(必須使用50μl樣品。如果沒有50μl，需要用TE緩沖液或水補足到50μl)加到柱子中Sephadex G50 界面的上面，套上一個自備的(最好是硅化的)離心管。
8. 2000rpm室溫離心1分鐘，離心管中的穿透液將含標記探針，未參入的標記物將滯留在介質(zhì)中。
9.電泳或點雜交檢測探針回收效率后直接使用或放-20℃長期保存。

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