特別提示:包括EB染色劑在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱(chēng):EB染色劑
英文名稱(chēng):Ethidium bromide
產(chǎn)品貨號(hào):QN1023
產(chǎn)品規(guī)格:100mg|1g
EB是一種高靈敏度的熒光染色劑,常用于觀(guān)察PAGE或瓊脂糖凝膠中的核酸,合成DNA及RNA的抑制劑及誘變劑,分離和測(cè)定核酸結(jié)構(gòu)。
CAS號(hào):1239-45-8
分子式:C21H20BrN3
分子量:394
純度(無(wú)水):>98.0%
熔點(diǎn):260~262℃
性狀:深紅色結(jié)晶或粉末
溶解性:溶于水(10mg/ml),磁力攪拌數(shù)小時(shí)以確保其完全溶解,然后用鋁箔包裹容器或轉(zhuǎn)移至棕色瓶中.
儲(chǔ)存條件:常溫
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名稱(chēng):紅細(xì)胞裂解液
貨號(hào):WE0218
規(guī)格:100ml
本產(chǎn)品是利用細(xì)胞內(nèi)外鹽離子濃度差可導(dǎo)致細(xì)胞膜脹破的原理來(lái)裂解紅細(xì)胞,主要用于實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除,比如:淋巴細(xì)胞的分離純化,經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。
使用方法:
1、向1倍體積的新鮮全血中加入3倍體積的紅細(xì)胞裂解液(如1ml新鮮全血加入3ml紅細(xì)胞裂解液)輕輕渦旋或顛倒混勻。
注意:如果對(duì)新鮮組織細(xì)胞進(jìn)行處理,需經(jīng)胰酶等消化成單個(gè)細(xì)胞懸液,離心收集細(xì)胞后再進(jìn)行后續(xù)操作。
2、冰上孵育15分鐘,其間輕輕渦旋混勻兩次。
注意:紅細(xì)胞裂解后,溶液應(yīng)該是清亮透明的。
3、4℃,450×g離心10分鐘收集白細(xì)胞,小心吸棄上清液。
4、向以上沉淀中加入兩倍體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細(xì)胞(如起始血液為1ml,則加入2ml的紅細(xì)胞裂解液)。
5、4℃,450×g離心10分鐘收集白細(xì)胞,小心并徹底吸去上清液。
6、重懸細(xì)胞,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
注意:如提取RNA,最好從此步開(kāi)始使用無(wú)RNase的溶液進(jìn)行。
儲(chǔ)存條件:室溫(15~30℃)
名稱(chēng):凝膠上樣染料,藍(lán)色 (6X)
貨號(hào):SV0822
規(guī)格:4ml
概述:
預(yù)混上樣染料溶液用于瓊脂糖和非變性聚丙稀酰胺凝膠電泳,可進(jìn)行不同的示蹤染色。溶液中含有 SDS,可使條帶清晰,避免有些內(nèi)切酶切割后結(jié)合在 DNA 上引起的條帶拖尾。由于高濃度的 SDS 能干擾 SYBR和GelRed 核酸熒光染料顯色。因此使用這兩種核酸染料時(shí),建議使用無(wú) SDS的紫色凝膠上樣染料(B7025)。凝膠上樣染料中的 EDTA,可螯合反應(yīng)緩沖液中10mM的 Mg2+,從而使反應(yīng)終止。溴酚藍(lán)是電泳的標(biāo)準(zhǔn)示蹤染料。在標(biāo)準(zhǔn)的 1% TBE 瓊脂糖凝膠中,它的遷移率大約與 300 bp的片段相同。橙黃
G 不會(huì)顯示在凝膠電泳照片中,除了一些最小的片段,橙黃 G 跑在凝膠的最前面。在標(biāo)準(zhǔn)的 1% TBE 瓊脂糖凝膠中,它的遷移率大約與 50 bp的片段相同。我公司也提供與溴酚藍(lán)遷移率相似的紫色染料。該染料在紫外燈下無(wú)陰影。
凝膠上樣染料組成成分:
1X 凝膠上樣染料,藍(lán)色:
2.5% Ficoll-400,11mM EDTA,3.3mM Tris-HCl(pH 8.0),0.017% SDS和0.015% 溴酚藍(lán)。
1X 凝膠上樣染料,橙色:
2.5% Ficoll-400,11mM EDTA,3.3mM Tris-HCl(pH 8.0),0.017% SDS和0.15% 橙黃 G。
1X 凝膠上樣染料,紫色:
2.5% Ficoll-400,10mM EDTA,3.3mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),0.08% SDS ,0.02% 染料 1 和
0.0008% 染料 2。
1X 凝膠上樣染料,紫色,無(wú) SDS:
2.5% Ficoll-400,10mM EDTA,3.3mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),0.02% 染料 1和0.0008% 染料 2。
注意:25 μl反應(yīng)體系中添加 5 μl 凝膠上樣染料,或 50μl反應(yīng)體系中加 10 μl 凝膠上樣染料。上樣前混勻。室溫保存。
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