非酶DNA清除劑(＞200nt)

特別提示：包括非酶DNA清除劑(＞200nt)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：非酶DNA清除劑(＞200nt)
英文名稱：Non-enzymatic DNA Scavenger
產(chǎn)品貨號：BTN60201
產(chǎn)品規(guī)格：1.5mL

用Trizol等方法提取的總RNA樣品中經(jīng)常會含有基因組DNA污染，這些污染會影響下游的RT-PCR和Northern雜交等實(shí)驗(yàn)。目前最常用的RNase-free DNase處理方法因DNase中所含殘留的RNase能破壞RNA完整性而具有很大缺陷。非酶法DNA清除劑不但徹底避免了RNase-free DNase的這一缺陷，同時還具有操作快速，穩(wěn)定性好和性價比高等諸多優(yōu)點(diǎn)，完全可以替代價格昂貴的RNase-free DNase。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.高效，能使總RNA中的基因組DNA污染降上百倍(根據(jù)PCR檢測)而RNA分子完整性不會受到任何影響。
2. 不含RNase污染，因?yàn)楸井a(chǎn)品為非酶產(chǎn)品，所用溶液又經(jīng)過液相RNase清除劑的處理(能不可逆地滅活RNase)；而在制備RNase-free DNase時，為避免DNase失活，處理?xiàng)l件往往比較溫和，所以終產(chǎn)品中往往殘留有RNase污染。
3.快速，全部操作在樣品管中完成，只需要十多分鐘，不需要37℃保溫和酚/氯fǎng抽提；而使用RNase-free DNase時，需要上述處理，增加了污染RNase的可能性。
4. 穩(wěn)定，本產(chǎn)品為非酶產(chǎn)品，可以常溫運(yùn)輸和4℃長期保存；而RNase-free DNase的運(yùn)輸和長期保存必須在低溫進(jìn)行。
5. 性價比高，單位成本遠(yuǎn)低于RNase-free DNase。
6. 只能回收長度在200nt以上的RNA(DNA Scavenger-2可以回收長度在200nt以上和以下的RNA)。

儲存條件：常溫運(yùn)輸、4℃保存,有效期一年。

使用方法：
1. 將總RNA溶液與DNA Scavenger按3：1的比例混合(即300μl RNA溶液需加100μL DNA Scavenger)。
2. 12000～15000g室溫離心10分鐘后小心棄上清，
3.在沉淀中加入1mL自備70%乙醇，震蕩半分鐘。
4. 12000～15000g室溫離心5分鐘后小心棄上清。
5. 將離心管短暫快速離心，小心吸棄余液。
6. 加入適量RNase-free水或液相RNase清除劑溶解RNA沉淀，立即使用或放-80℃長期保存。
注意:本產(chǎn)品只能回收長度在200nt以上的RNA，RNA樣品中含有小RNA，將會丟失。對如果要去除小RNA樣品中的DNA污染，建議使用我公司的DNA Scavenger-2(BTN70801)

根據(jù)您的關(guān)注的非酶DNA清除劑(＞200nt)，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：
 

貨號	名稱	規(guī)格
BTN91103	非凍型拭子病毒保存液	100mL
BTN101109	糞便RNA柱式提取試劑盒	50次
BTN120503	藻類RNA柱式提取試劑盒	50次
BTN60604	DEPC處理水	250mL
BTN3191	Tris飽和酚	100mL
YT526	YTM 總RNA抽提試劑(Trizol法)	100ml
WE0194	病毒RNA提取試劑盒	50次

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名稱：血清血漿游離RNA提取試劑盒
貨號：BTN130978
規(guī)格：50次
本試劑盒是專門用于從血清/血漿等液體樣品中提取游離RNA的產(chǎn)品。

試劑盒特點(diǎn)：
1. 操作簡單，整個過程只需要20分鐘左右，不需要額外在洗柱液中補(bǔ)加乙醇。
2. 靈敏度高，通過RT-PCR檢測到的最終靈敏度可以達(dá)到50拷貝/mL。
3. 安全無毒，不需要使用苯酚和氯fǎng等有機(jī)溶液。
4.與RT-PCR和熒光RT-PCR兼容。
5. 價廉物美，性價比遠(yuǎn)低于國外同類產(chǎn)品。
6.適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細(xì)胞上清液等無細(xì)胞材料。

試劑盒組成：

成份	編號	規(guī)格
溶液A	BTN130978A	30mL
離心吸附柱(小提)	BTN60911	50套
通用洗柱液	BTN60408	50mL
RNA洗脫液	BTN71207	10mL

儲存條件：常溫運(yùn)輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在1.5mL離心管中加入0.1-0.2mL血清/血漿樣品。如果樣品需要富集，可以將1.5mL液體在4℃下24，000 g冷凍離心60分鐘，移棄1.3mL后繼續(xù)操作。
2. 加入0.6mL溶液A，振蕩30秒混勻后室溫放置10分鐘。注意：溶液A在 4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
3. 將溶液全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘。
4. 12000～15000g室溫離心1分鐘，棄收集管中穿透液。
5. 加入0.8mL通用洗柱液到離心吸附柱中，12000～15000g室溫離心1分鐘，棄收集管中穿透液。
6. 12000～15000g室溫離心半分鐘。
7.在離心吸附柱的濾膜的中部加入30-100μL通用洗脫液，然后將離心吸附柱套入一新的1.5mL離心管中，室溫放置2分鐘。
8. 12000～15000g室溫離心1分鐘，離心管中收集的樣品即為RNA。
9. RNA樣品可以直接用于RT-PCR或逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，也可放-80℃長期保存。注：游離的RNA一般含量極少，不宜用電泳法檢測。

疑難解答
Q：提取血清血漿等液體樣品/病毒核酸(RNA或DNA)為何很難？
A：原因一是量少。病毒顆粒中的RNA或DNA是作為遺傳物質(zhì)保存，每個病毒最多只攜帶幾個拷貝(而一個細(xì)胞中有上萬種RNA分子，每種RNA有很多拷貝)，同時其長度也十分有限(一般不到細(xì)胞基因組的萬分之一)，樣品中病毒數(shù)往往又不是很多，使得樣品中病毒核酸的絕對量往往比一個細(xì)胞中核酸的絕對量還少，所以操作中十分容易丟失。另外，由于得到的核酸絕對量很少，不能使用電泳和測OD檢測，只能通過PCR或RT-PCR檢測，而PCR或RT-PCR的條件又需要優(yōu)化，所以要確定提取是否成功十分不容易。