17α-羥化酶檢測試劑盒說明書

17α-羥化酶檢測試劑盒說明書檢測范圍：人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細胞因子、植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內分泌、活性多肽、肝纖維化、血栓與止血、自身抗體科研elisa檢測試劑盒。

產品名稱	英文名稱	規(guī)格
17α-羥化酶檢測試劑盒說明書	17α-Hydroxylase	96T/48T

主要組成成分：試劑 
    性狀：液體 
    產品規(guī)格：96T/48T 
    96T指可以做94個標本，2個標準對照 
    48T指可以做47個標本，1個標準對照 
    96T-84個樣本 
    48T-42個樣本 
    待檢樣本：體液，血清，血漿，細胞培養(yǎng)上清液，尿液，組織勻漿,心房水標本等等。 
ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行生產，已獲得國家承認的“三證”，每一個產品都有對應的生產批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等；
控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標本時采用無菌試管，經檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

操作流程：
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測定
1.有質量問題免費包換，合同上注明了的（質量問題包括運輸不當，客戶在使用過程中測不出結果，等等�。�
2.全程技術指導.（包括售前的標本收集，使用過程中不明白的地方，實驗結束后的數據分析，有任何疑問，我們技術都會即時給你去電）
3.提供免費代測的服務。（你只需把標本寄過來，我們?yōu)槟愎?jié)省時間，幫你出結果，原始數據，分析數據均可提供，一般時間是5天左右）
4.客戶有任何問題，我們都是在一個工作日之內給出解決方案。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務！
為什么實驗過程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應更充分，振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標專用96孔微孔板振蕩器。
孵育過程振蕩，可以加快、加強抗原抗體分子間的相互碰撞接觸，使得反應過程更加完全，OD值通常會比未振蕩孵育的結果要高；洗滌過程振蕩，可以使洗板更干凈，在很大程度上能降低背景值，同時可以提高試劑盒檢測的靈敏度，具體操作請參見說明書。