塞皮克病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家

產(chǎn)品名稱：塞皮克病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家
英文名稱：Sepik VirusRTPCR
規(guī)格：50T
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件及有效期：-20℃±5℃避光保存，有效期 12 個(gè)月。
產(chǎn)品運(yùn)輸：標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2-8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②塞皮克病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家 堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
塞皮克病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家 PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板�？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
 核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
技術(shù)參數(shù)：
1.符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 1686-2005《新城疫病毒中強(qiáng)毒株檢測(cè)方法：熒光RT-PCR法》的檢測(cè)要求，可用于禽肉、禽類組織臟器、禽類排泄和分泌物，及其泄殖腔和咽喉拭樣中新城疫病毒的檢測(cè)。
2. 靈敏度：對(duì)于接種的雞胚尿囊液，檢測(cè)的zui高稀釋度可達(dá)10-8～10-7，與雞胚病毒分離方法的靈敏度接近。定量檢測(cè)線性范圍可達(dá)10-1010拷貝/ml。
3. 特異性：采用zui新基因序列數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)計(jì)，并通過系統(tǒng)驗(yàn)證，新城疫病毒RT-PCR能夠檢測(cè)所有已知新城疫病毒毒株。對(duì)于其它禽類感染因子，本試劑盒檢測(cè)結(jié)果為陰性。
4. 產(chǎn)品盒組成：（不包括新城疫病毒RNA提取試劑,用戶可采用通用型病毒RNA提取試劑盒或試劑盒推薦的提取方法。） 組成成份（48T/kit） 規(guī)格 數(shù)量 RNA提取液 30ml 1瓶 DEPC水 5 ml 1瓶 新城疫病毒RT-PCR一步法反應(yīng)液 920ul 1管 逆轉(zhuǎn)錄酶（5U/ul） 48ul 1管 Taq HS酶（5U/ul） 24ul 1管 新城疫病毒陽(yáng)性對(duì)照 100ul 1管新城疫病毒陰性對(duì)照 100ul 1管 使用說(shuō)明書 一份。
【使用方法】:
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。