熊貓紅細(xì)胞分離液

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產(chǎn)品名稱(chēng)：熊貓紅細(xì)胞分離液
英文名稱(chēng)：Panda erythrocyte separation solution
產(chǎn)品貨號(hào)：JH0591
產(chǎn)品規(guī)格：200mL



根據(jù)您的關(guān)注的熊貓紅細(xì)胞分離液，熊貓紅細(xì)胞分離試劑盒，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：

 

貨號(hào)	名稱(chēng)	規(guī)格
BTN120905	人淋巴細(xì)胞分離液(FICOLL 配置)	200mL
BTN120909	小鼠腫瘤細(xì)胞分離液	200mL
JH0020	雞臟器組織單核細(xì)胞分離液	2×200mL
JH0021	人臟器組織中性粒細(xì)胞分離液	200mL
JH0022	大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離液	200mL
JH0053	豬外周血單核細(xì)胞分離液	2×200mL

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名稱(chēng)：淋巴細(xì)胞分離液1.077
貨號(hào)：SY0532
規(guī)格：100ml|5×100ml
淋巴細(xì)胞分離液（Lymphocyte Separation Medium，簡(jiǎn)稱(chēng)LSM）是一種無(wú)菌的即用型分離液，基于Böyum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過(guò)一些改良，使得操作簡(jiǎn)單快速且分離效率更高。每100 ml淋巴細(xì)胞分離液中含有6.2 g 聚蔗糖（Ficoll）和9.4 g 泛影酸鈉，20℃下的密度為1.0770-1.0800 g/ml。不僅適用于外周血淋巴細(xì)胞，也可分離其他組織來(lái)源的淋巴細(xì)胞，包括臍帶血和骨髓細(xì)胞。

工作原理
去纖維蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋?zhuān)�加在分離液上層，之后低速離心30 min。在離心過(guò)程中，差速遷移使其最終形成幾個(gè)細(xì)胞分層。聚集在管底的顆粒主要是紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞，通過(guò)梯度遷移至管底。根據(jù)其密度的大小，淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞如單核細(xì)胞，以及血小板分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過(guò)吸取分界層溶液回收，并通過(guò)進(jìn)一步清洗來(lái)去除血小板，LSM和血漿。

操作方法
注：此操作流程適用于去纖維蛋白或抗凝血?jiǎng)┨幚磉^(guò)的人血。對(duì)于其他物種或者其他組織的血液，可能需要對(duì)此步驟做出一定的改進(jìn)。



1）輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合；
2）無(wú)菌條件轉(zhuǎn)移3 ml LSM到15 ml離心管中；
3）用2 ml 生理鹽水混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液；
4）小心將稀釋血液加入3 ml LSM（室溫即可）的上層，使得在血液和LSM間形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混入LSM中；
5）室溫下400g離心15-30min，離心可以沉淀紅細(xì)胞和多形核白細(xì)胞，同時(shí)可以在LSM上形成一層單核-淋巴細(xì)胞分層，如下圖所示（從上到下，依次分為血漿層-淋巴細(xì)胞層-LSM層-RBC顆粒）；
6）吸出淋巴細(xì)胞層上方2-3 mm內(nèi)的血漿；
7）吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM層，并轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細(xì)胞層中，室溫離心10 min，離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞的范圍，例如160 – 260 g（清洗去除LSM和降低血小板含量）；
8）用平衡鹽緩沖液再清洗細(xì)胞一次，最后取適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。

注意事項(xiàng)
1）稀釋去纖維蛋白血液或肝素化血液用的生理鹽水為無(wú)菌液體。
2）為保持淋巴細(xì)胞的活性，應(yīng)該采血后盡快進(jìn)行分離。分離細(xì)胞層實(shí)際上是單個(gè)核細(xì)胞層，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。
3）若溶液變渾濁，呈現(xiàn)出不同的黃色或可能有受污染跡象，不可再使用。
4）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。