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羥甲基化DNA定量試劑盒(熒光法)
英文名稱:MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit (Fluorometric)總訪問(wèn):1173
國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口:進(jìn)口半年訪問(wèn):1
產(chǎn)地/品牌:USA/EPI產(chǎn)品類(lèi)別:分子生物學(xué)試劑
規(guī)       格:A-P-1037 最后更新:2012-2-21
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羥甲基化DNA定量試劑盒(熒光法)  貨號(hào):A-P-1037

MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit (Fluorometric)



背景資料

 


MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒(熒光法)提供了最優(yōu)化的緩沖液和試劑,運(yùn)用熒光定量的方法,通過(guò)檢測(cè)微孔板上5-hmC的水平,以定量檢測(cè)全基因組的DNA羥甲基化水平。而沒(méi)有甲基化和未甲基化胞嘧啶的結(jié)合活性。本試劑盒與MethylFlash DNA羥甲基化定量試劑盒(熒光法)能夠完美配合,用來(lái)同時(shí)定量檢測(cè)DNA的甲基化和羥甲基化水平。
關(guān)于5-hmC
5-hmC是近年來(lái)在動(dòng)物組織中發(fā)現(xiàn)的,由胞嘧啶修飾而來(lái)。5-hmC在表觀遺傳學(xué)上的功能可能與5-甲基化胞嘧啶(5-mC)不同。盡管到現(xiàn)在為止還不確知其功能,有研究者猜測(cè)它在調(diào)控基因的表達(dá)與關(guān)閉過(guò)程中起著重要的作用。5-mC的發(fā)現(xiàn)讓我們不得不重新評(píng)估DNA甲基信息,也不得不監(jiān)測(cè)人類(lèi)的健康組織和病理組織之間5-mC相對(duì)分布的差異。在Epigentek的MethylFlash技術(shù)之前,我們還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)任何直接的常規(guī)方法來(lái)檢測(cè)5- hmC,以及區(qū)分5-hmC和5-mC。
5-hmC 和 5-mC的區(qū)別
時(shí)下常用的DNA甲基化分析方法包括限制內(nèi)切酶酶切和亞硫酸氫鹽或MeDIP介導(dǎo)的MS-PCR和測(cè)序,這些技術(shù)都不適合用來(lái)檢測(cè)5-hmC,因?yàn)樗c5-mC事實(shí)上很難用這類(lèi)方法區(qū)分開(kāi)來(lái)。為了解決這個(gè)問(wèn)題,Epigentek研制了MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒(熒光法)。本試劑盒提供了一種很經(jīng)濟(jì)的方法來(lái)檢測(cè)5-羥甲基化胞嘧啶,并且區(qū)分5-hmC, 5-mC, 和 C,使得研究者能夠重新評(píng)估他們的DNA甲基化信息,也能夠在新樣品中尋找DNA羥甲基化。本試劑盒有以下優(yōu)點(diǎn)和特性:
簡(jiǎn)單易學(xué)方便快捷的熒光分析技術(shù)。整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需要3小時(shí)20分鐘。
靈敏度高,檢測(cè)極限為10pg羥甲基化的DNA
高度的專(zhuān)一性,不與甲基化胞嘧啶和非甲基化的胞嘧啶結(jié)合。5-hmC被專(zhuān)一地堅(jiān)持。試劑盒中還提供有適用于定量所有物種羥甲基化DNA的普遍陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照。
96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量。
簡(jiǎn)單、可靠、檢測(cè)條件恒定。

 


產(chǎn)品描述

 


MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒(熒光法)中含有定量檢測(cè)全基因組羥甲基化所必需的所有試劑。在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中,DNA被固定在一種有DNA吸附能力的孔上,羥甲基化的片段會(huì)被捕獲劑以及檢測(cè)抗體識(shí)別,用熒光分光光度計(jì)讀取在ex=530 +/-20/em=580 +/-20 nm處的熒光強(qiáng)度來(lái)定量。羥甲基化的DNA的量與熒光強(qiáng)度值成線性關(guān)系,可以通過(guò)本試劑盒提供的方程來(lái)計(jì)算兩種不同的羥甲基化DNA樣品的相對(duì)羥甲基化狀態(tài)或者通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線完全定量5-mc;谄涔ぷ髟砗臀⒖装迥J剑驹噭┖锌梢杂糜诟鞣N物種來(lái)源的多種樣品形式,包括培養(yǎng)的細(xì)胞、新鮮和冷凍的組織、石蠟包埋組織、血漿/血清樣品以及體液樣品。本試劑盒曾經(jīng)對(duì)來(lái)自小鼠大腦和海拉細(xì)胞系的樣品成功地進(jìn)行了5-hmC的定量,所得到的結(jié)果與用HPLC和LC-MS的方法相當(dāng)。通過(guò)使用本試劑盒,研究者們首次在正常人類(lèi)腦部組織和結(jié)腸組織中發(fā)現(xiàn)了高豐度的5-hmC。同時(shí),研究結(jié)果還顯示,正常人類(lèi)腦部組織和結(jié)腸組織中5-hmC分別占總甲基化胞嘧啶(5-mC和5-hmC的總和)的32%和16%。相反,在結(jié)腸癌細(xì)胞系(HCT116)和宮頸癌細(xì)胞系(HeLa)中,5-hmC的比率很低,幾乎沒(méi)有。該羥甲基化DNA定量試劑盒(熒光法)內(nèi)主要產(chǎn)品組份包括:HF1 (10X Wash Buffer) HF2 (Binding Solution) HF3 (Negative Control I, 20 ug/ml) HF4 (Negative Control II, 20 ug/ml) HF5 (Positive Control, 20 ug/ml) HF6 (Capture Antibody, 1000 ug/ml HF7 (Detection Antibody, 400 ug/ml) HF8 (Enhancer Solution) HF9 (Fluoro Developer) HF10 (Fluoro Enhancer) HF11 (Fluoro Dilutor) 8-Well Assay Strips (With Frame) 用戶指南手冊(cè)

 


產(chǎn)品特點(diǎn)

 


1·整個(gè)比色法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的操作簡(jiǎn)單易學(xué),方便快捷,只需要3小時(shí)45分鐘就能完成實(shí)驗(yàn)。96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量;2·試劑盒中提供通用陽(yáng)性和陰性對(duì)照,能用于定量檢測(cè)各種來(lái)源的DNA樣品中的羥甲基化狀態(tài),包括哺乳動(dòng)物、植物、真菌、細(xì)菌以及病毒;3·試劑盒中含有定量檢測(cè)全基因組DNA羥甲基化實(shí)驗(yàn)所有用到的試劑,包括陽(yáng)性和陰性對(duì)照。直接測(cè)定熒光強(qiáng)度的方法來(lái)進(jìn)行定量檢測(cè)取代了已過(guò)時(shí)的和劣質(zhì)的方法,無(wú)須DNA消化/變性、提取,不用使用套色版,不接觸放射性材料;4·試劑盒用到的新方法和專(zhuān)利試劑使得羥甲基化DNA定量實(shí)驗(yàn)結(jié)果精確、高度靈敏特異,檢測(cè)極限為40 pg的羥甲基化DNA,檢測(cè)范圍寬至40 pg 到 20 ng,檢測(cè)靈敏度是HPLC的十倍(0·008% vs 0·08%),不與DNA上甲基化或者未甲基化胞嘧啶反應(yīng),特異檢測(cè)5-hmC。

 


保存建議

 


在接收到Epigentek試劑盒后請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)建議,使用不同的保存條件或溫度來(lái)保存試劑盒內(nèi)組分

 


產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

 




 


其他

 


Epigentek集團(tuán)公司是全球領(lǐng)先的創(chuàng)新技術(shù)和表觀遺傳學(xué)相關(guān)研究產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)商和供應(yīng)商。公司開(kāi)發(fā)了包括400多個(gè)專(zhuān)利產(chǎn)品的全面的產(chǎn)品組合,為表觀遺傳學(xué)方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案。作為多家知名品牌的代理,艾美捷與Epigentek一起為研究者們提供最好、最新的表觀遺傳學(xué)研究工具而不斷擴(kuò)大產(chǎn)品及服務(wù)質(zhì)量。

 

更多產(chǎn)品操作手冊(cè)請(qǐng)您發(fā)送郵件到:tech@aderr.com 或加技術(shù)QQ:1951545998

 

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