特別提示:包括糜蛋白酶測(cè)試盒/胰凝乳蛋白酶測(cè)試盒(紫外分光光度法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:糜蛋白酶測(cè)試盒/胰凝乳蛋白酶測(cè)試盒(紫外分光光度法)
產(chǎn)品貨號(hào):SK124-2
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
測(cè)定意義:
糜蛋白酶,又稱胰凝乳蛋白酶,是胰腺分泌的一種蛋白水解酶,能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似,但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化,對(duì)膿性和非膿性痰液均有效;也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合,如白內(nèi)障摘除。
測(cè)定原理:
糜蛋白酶催化ATEE水解,產(chǎn)物在237 nm有特征光吸收;通過(guò)測(cè)定237 nm 光吸收增加速率,來(lái)計(jì)算糜蛋白酶活性。
自備儀器和用品:
臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。
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名稱:線粒體呼吸鏈復(fù)合物II試劑盒(琥珀酸-輔酶Q還原酶)
貨號(hào):SNM101
規(guī)格:20管/10樣
檢測(cè)指標(biāo):線粒體呼吸鏈復(fù)合物II
線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚,通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化,即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于其適合于各種純化線粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)。可用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。
線粒體呼吸鏈復(fù)合物II,通常稱為琥珀酸-輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶(Succinate-Coenzyme Q Reductase;Succinate Dehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體:含有四個(gè)亞單位,包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide;FAD)和三個(gè)鐵硫中心(Fe-S clusters),以及細(xì)胞色素b亞單位,其最特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸-輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸(succinate)被氧化為富馬酸(fumarate),線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會(huì)導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤(paraganglioma)、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤(pheochromocytoma)和Leigh綜合征;阽晁岬孜,通過(guò)琥珀酸-輔酶Q還原酶的催化,氧化為富馬酸,同時(shí)氧化型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIP)轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIPH2),在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化(600nm 波長(zhǎng)),由此定量測(cè)定琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異活性。
試劑盒組份:
緩沖液(Reagent A) 20 毫升
反應(yīng)液(Reagent B) 2.5 毫升
陰性液(Reagent C) 2 毫升
底物液(Reagent D) 500 微升
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品為21 次操作,包括背景對(duì)照
2. 操作時(shí),須戴手套
3. 反應(yīng)液(Reagent B)含有毒性物質(zhì),避免直接用手接觸
4. 系統(tǒng)操作過(guò)程中,背景測(cè)定只需1 次
5. 線粒體樣品檢測(cè)前,須溶解;建議凍存融解(-70℃至37℃)循環(huán)3 次
6. 如果增強(qiáng)酶活檢測(cè),建議使用線粒體復(fù)合物待測(cè)樣品預(yù)處理試劑盒-S10342
7. 加入樣品啟動(dòng)反應(yīng)后3 秒內(nèi)即刻比色測(cè)定
8. 比色測(cè)定初始讀數(shù)(0 分鐘讀數(shù))0.4 左右為理想狀態(tài)
9. 反應(yīng)1 分鐘后比色測(cè)定值趨于穩(wěn)定;測(cè)定值由高到低變化;測(cè)定可以持續(xù)5 分鐘
10.測(cè)定值由高到低變化,即5 分鐘測(cè)定讀數(shù)低于0 分鐘測(cè)定讀數(shù),表明有酶活性
11.比色測(cè)定后,比色皿須清洗徹底
12.建議待測(cè)樣本線粒體蛋白濃度為10 微克/100 微升;如果樣本酶活性過(guò)低或過(guò)高,則可以增加或降低樣本量;注意計(jì)算公式的調(diào)整(本公司提供線粒體溶解試劑盒為后續(xù)的線粒體蛋白濃度測(cè)定的預(yù)處理試劑盒和 Bradford 蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒)
13.如果使用細(xì)胞或組織裂解懸液,則蛋白濃度為50 微克/100 微升
14.線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q 還原酶)單位活性定義為:在30℃,pH 7.5 條件下,每分鐘內(nèi)能夠還原1 微摩爾合成輔酶Q 同功類似物二氯酚靛酚(DCPIP)所需的酶量作為一個(gè)活性單位
15.本公司提供系列線粒體及其酶類技術(shù)產(chǎn)品

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