細(xì)胞和病毒生產(chǎn)的放大培養(yǎng)面臨挑戰(zhàn)。當(dāng)需要生產(chǎn)量增加千倍時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)瓶對(duì)于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)是不可行的。
微載體為生物反應(yīng)器中貼壁細(xì)胞的生長(zhǎng)提供了方便, 微載體充當(dāng)貼壁細(xì)胞可附著的支架,允許它們?cè)鲋,而生物反?yīng)器使細(xì)胞-微載體復(fù)合體自由懸浮在培養(yǎng)基中。因此,貼壁細(xì)胞也可以像懸浮細(xì)胞那樣生長(zhǎng),從而簡(jiǎn)化了放大培養(yǎng),并允許利用現(xiàn)有的資源用于過(guò)程優(yōu)化和生產(chǎn)。
微載體細(xì)胞計(jì)數(shù)的難題
細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力是優(yōu)化和監(jiān)測(cè)大規(guī)模生物生產(chǎn)的關(guān)鍵參數(shù)。
傳統(tǒng)方法的微載體的細(xì)胞計(jì)數(shù)耗時(shí)耗力,且計(jì)數(shù)結(jié)果不準(zhǔn)確,需要離心樣品、PBS重懸、胰蛋白酶消化細(xì)胞和臺(tái)盼藍(lán)或者結(jié)晶紫染色等多個(gè)步驟來(lái)計(jì)數(shù)在微載體上生長(zhǎng)的細(xì)胞。
細(xì)胞計(jì)數(shù)影響因素:
步驟多,消耗時(shí)間長(zhǎng)
細(xì)胞結(jié)團(tuán)問(wèn)題
胰酶消化不完全
細(xì)胞釋放不完全
微載體干擾細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果
NucleoCounting提供微載體細(xì)胞計(jì)數(shù)難題解決方案
Nucleocounting是一種微載體細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力分析的精確可靠的方法。Nucleocounting方法通過(guò)熒光染色細(xì)胞核的方法檢測(cè)細(xì)胞,這些細(xì)胞用熒光染料DAPI進(jìn)行標(biāo)記,DAPI高度特異結(jié)合DNA,即使在有細(xì)胞碎片的情況下,也能精確檢測(cè)細(xì)胞核。
通過(guò)獨(dú)特的預(yù)包埋有熒光染料的Via1-Cassette™將細(xì)胞上樣、熒光染色、腔體細(xì)胞計(jì)數(shù)組合到一個(gè)工作流程,然后將Via1-Cassette™裝載到計(jì)算細(xì)胞數(shù)量和存活率的NucleoCounter® NC-200™機(jī)器卡槽中。
NucleoCounting節(jié)省微載體細(xì)胞計(jì)數(shù)的時(shí)間,計(jì)數(shù)精確可靠
與傳統(tǒng)的胰蛋白酶消化方法相比,NucleoCounting工作流程的去除了幾個(gè)離心,移液和孵育步驟。 整個(gè)細(xì)胞計(jì)數(shù)過(guò)程在不到5分鐘內(nèi)完成。
ReagengA100 可以完全將細(xì)胞從微載體上消化下來(lái),消除細(xì)胞結(jié)團(tuán)的影響。此外,微載體不含細(xì)胞核,不會(huì)被DAPI染料計(jì)數(shù),不干擾細(xì)胞的計(jì)數(shù)結(jié)果。
此外,NuclecounterNC200產(chǎn)品符合GMP 要求,能夠進(jìn)行21CFRpart11 電子簽名,提供3Q 認(rèn)證,且該產(chǎn)品無(wú)需清洗和無(wú)需校正,享受零成本售后服務(wù)。