mRNA原位雜交試劑盒說(shuō)明書(shū)
mRNA原位雜交試劑盒
原位雜交成套試劑盒，由于采用高效標(biāo)記的探針和敏感性加強(qiáng)型原位雜交檢測(cè)試劑盒；使得原位雜交實(shí)驗(yàn)的成功率大大提高，操作也更簡(jiǎn)便。但仍有一些問(wèn)題是引起注意的；
1、有條件應(yīng)盡可能用新鮮標(biāo)本，并及時(shí)進(jìn)行固定。固定液為4%多聚甲醛(0.1MPBS，PH7.0-7.6)含0.1%DEPC。因?yàn)閙RNA類(lèi)基因容易降解。
2、標(biāo)本的消化對(duì)原位雜交比較重要，適當(dāng)?shù)南瘜⑹拱谢虺浞直┞叮黾犹结樀慕佑|性。但過(guò)度的消化將使標(biāo)本明顯減薄乃至消失。不同的標(biāo)本對(duì)消化的敏感性不同。常用的消化酶有蛋白酶K和胃蛋白酶。大量標(biāo)本實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)仔細(xì)摸索最佳的消化條件。蛋白酶K的消化條件為10ug/mL(0.1M TBS,PH7.2-7.6)，37℃消化1-5分鐘。
3、雜交后的洗滌對(duì)信號(hào)/背景/強(qiáng)度有密切關(guān)系，洗滌時(shí)間越短，信號(hào)越強(qiáng)，背景也越高；洗滌時(shí)間超長(zhǎng)，信號(hào)越低。適當(dāng)?shù)南礈鞎r(shí)間會(huì)獲得理想的信號(hào)強(qiáng)度和可以忽略的背景染色。mRNA原位雜交試劑盒
原位雜交成套試劑盒，由于采用高效標(biāo)記的探針和敏感性加強(qiáng)型原位雜交檢測(cè)試劑盒；使得原位雜交實(shí)驗(yàn)的成功率大大提高，操作也更簡(jiǎn)便。但仍有一些問(wèn)題是引起注意的；
1、有條件應(yīng)盡可能用新鮮標(biāo)本，并及時(shí)進(jìn)行固定。固定液為4%多聚甲醛(0.1MPBS，PH7.0-7.6)含0.1%DEPC。因?yàn)閙RNA類(lèi)基因容易降解。
2、標(biāo)本的消化對(duì)原位雜交比較重要，適當(dāng)?shù)南瘜⑹拱谢虺浞直┞叮黾犹结樀慕佑|性。但過(guò)度的消化將使標(biāo)本明顯減薄乃至消失。不同的標(biāo)本對(duì)消化的敏感性不同。常用的消化酶有蛋白酶K和胃蛋白酶。大量標(biāo)本實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)仔細(xì)摸索最佳的消化條件。蛋白酶K的消化條件為10ug/mL(0.1M TBS,PH7.2-7.6)，37℃消化1-5分鐘。
3、雜交后的洗滌對(duì)信號(hào)/背景/強(qiáng)度有密切關(guān)系，洗滌時(shí)間越短，信號(hào)越強(qiáng)，背景也越高；洗滌時(shí)間超長(zhǎng)，信號(hào)越低。適當(dāng)?shù)南礈鞎r(shí)間會(huì)獲得理想的信號(hào)強(qiáng)度和可以忽略的背景染色。mRNA原位雜交試劑盒
標(biāo)簽：
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