如何選擇最合適您細(xì)胞分選的MACS分選柱？

瀏覽次數(shù)：7509　發(fā)布日期：2021-6-29　來(lái)源：廣州東銳

美天旎分選柱（Column）是MACS技術(shù)的核心，其特點(diǎn)如下：填充有不同規(guī)格的鐵珠，可分選或者去除10^7-10^10細(xì)胞；表面親水包被，不損傷細(xì)胞，同時(shí)保證流速；可以將磁場(chǎng)放大1000-10000倍，因此只需極少的細(xì)胞表位被識(shí)別即可被磁場(chǎng)捕獲，從而為后續(xù)實(shí)驗(yàn)預(yù)留足夠抗原表位，如磁珠分選后的細(xì)胞無(wú)需切除磁珠即可直接染流式抗體，而不受影響。

美天旎的分選柱分幾類(lèi)，如MS、LS、LD、autoMACS column 等，那么，這些有什么區(qū)別呢，您在實(shí)驗(yàn)中又該如何去選擇適合您的分選柱呢？

我們知道，美天旎的MACS分選策略有陽(yáng)性分選、去除分選，那我們就按兩種分選策略來(lái)分析如何選擇恰當(dāng)?shù)姆诌x柱：

陽(yáng)性分選
1、根據(jù)要分選的細(xì)胞數(shù)量選擇分選柱：
如下圖所示：

MS柱容納的最大細(xì)胞上樣量是2×10^8細(xì)胞（既包含陽(yáng)性細(xì)胞又包含陰性細(xì)胞），而其能捕獲的陽(yáng)性細(xì)胞最多是10^7。
LS分選柱最大細(xì)胞上樣量是2×10^9細(xì)胞（既包含陽(yáng)性細(xì)胞又包含陰性細(xì)胞），而其能捕獲的陽(yáng)性細(xì)胞最多是10^8。

2、目的細(xì)胞是常見(jiàn)細(xì)胞還是稀有細(xì)胞
為了在分選稀有細(xì)胞（表達(dá)率〈5%）時(shí)得到較更高的純度，您可以使用兩個(gè)分選柱：用一根分選柱進(jìn)行一次分選后，陽(yáng)性成份再過(guò)一次新的分選柱。在陽(yáng)性分選中，過(guò)兩次分選柱可以獲得更高純度的細(xì)胞。

3、大體積的細(xì)胞
另外，如果您要分選的目的細(xì)胞是體積較大的特殊細(xì)胞，如原生動(dòng)物細(xì)胞、人皮膚郎罕式細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞、心肌細(xì)胞等，那推薦您使用Large cell columns。因?yàn)榇蠹?xì)胞柱的鐵珠間隙足夠大，容許這些特殊的大體積細(xì)胞順利通過(guò)。

去除分選
去除分選中需要考慮以下幾個(gè)因素：
1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads嗎？
2 抗原表達(dá)強(qiáng)還是弱呢？
3 您需要更高的純度還是回收率呢？
4 您需要分選多少細(xì)胞？
根據(jù)這幾個(gè)因素，您可以按下圖的標(biāo)識(shí)來(lái)選擇合適的去除分選柱。