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脂多糖(LPS)的提取及純化的過程和方法

瀏覽次數(shù):1877 發(fā)布日期:2023-4-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)根據(jù)О-特異性側鏈的存在與否可分為光滑型smooth-form,S-LPS用粗糙型rough-form,R-LPS兩大類前者的組成成分有類脂A、核心寡聚糖及О-特異性側鏈,而后者僅含有類脂A及完整或部分核心成分。這兩類LPS分子在某些物理特征上表現(xiàn)出顯著的差異性主要表現(xiàn)為表觀分子量及水溶性方面。
 

脂多糖(LPS)的提取與純化


純度對于研究LPS的物理、化學及生物學特性是至關重要的,因為細菌其他成分的污染可影響LPS的物理特性及生物學活性。LPS制劑中最常見的污染物質是核酸、蛋白質及多聚糖,這類污染物質存在的量取決于LPS的提取和純化方法。

70年代以前提取LPS最常用的方法為Westphal等于1952年介紹的酚水法phenol water,PW),用這一方法提取的LPS純度較高。污染蛋白質含量僅為1~3%,而在此以前所應用的方法如三氯醋酸法,超聲波法、正丁醇提取法等所提取得到的LPS蛋白污染量可超過10%,因而PW方法是一種較為有效的方法。

自1969年Galanos 等介紹苯酚-氯仿-石油醚phenol-chloro-form-petroleum ether,PCP法后,LPS的純度又得到了顯著的提高。一方面,經PW法提取得到的S-LPS可以PCP法純化,另一方面,R-LPS由于脂溶性成分的含量較高,因而可直接應用PCP法進行提取與純化。PCP法可去除LPS中常見的污染物質。最終得到的純化LPS不含核酸及多聚糖,蛋白含量亦可控制在1%以下。

LPS中存在的另一類污染物質為無機金屬離子及小分子量多胺成分,它們的存在可影響LPS的物理性狀及生物學活性。應用電透析可將這類成分除去。

發(fā)布者:科德角國際生物醫(yī)學科技(北京)有限公司
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標簽: 內毒素
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