微生物檢測膜過濾法的流程以及推薦方案

以下是基于膜過濾法的微生物檢測流程與技術(shù)要點的系統(tǒng)總結(jié)：
 
一、核心原理‌
膜過濾法通過特定孔徑的微孔濾膜（通常為0.45μm或0.22μm）截留液體樣品中的微生物，經(jīng)沖洗去除干擾物質(zhì)后，轉(zhuǎn)移濾膜至培養(yǎng)基培養(yǎng)，最終通過菌落計數(shù)評估微生物含量。該方法尤其適用于含抑菌成分或微生物濃度低的樣品（如注射劑、純化水）。
 
二、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程‌
1、實驗準(zhǔn)備‌
◆設(shè)備選擇‌：使用薄膜過濾器（如316不銹鋼材質(zhì)）、無菌濾杯、無油真空泵（如SZKB-3A型）及無菌濾膜（推薦預(yù)滅菌混合纖維素酯濾膜）。
◆環(huán)境控制‌：需在超凈工作臺（潔凈度≥100級）內(nèi)操作，工具需火焰滅菌。
2、樣品處理‌
◆稀釋或均質(zhì)‌：預(yù)估微生物含量，選擇適當(dāng)稀釋倍數(shù)（如1:10至1:1000）。
◆過濾與沖洗‌：
▸將樣品注入濾杯，啟動真空泵抽濾，微生物截留于濾膜表面；
▸用無菌緩沖液（如100mL生理鹽水）沖洗濾膜，去除抑菌劑殘留。
3、濾膜轉(zhuǎn)移與培養(yǎng)‌
◆無菌鑷子夾取濾膜，菌面朝上貼附于瓊脂培養(yǎng)基（如R2A瓊脂或營養(yǎng)瓊脂）表面，避免氣泡生成。
◆培養(yǎng)條件：
需氧菌：30-35℃培養(yǎng)48-72小時；
霉菌/酵母菌：20-25℃培養(yǎng)5-7天。
4、結(jié)果分析‌
1、統(tǒng)計濾膜上菌落數(shù)（30-300 CFU為有效范圍），計算微生物濃度：
2、陰性對照組應(yīng)無微生物生長。

三、應(yīng)用場景‌
◆ 制藥工業(yè)‌：注射劑、滴眼液的無菌檢查及微生物限度檢測；
◆ 食品/環(huán)境監(jiān)測‌：飲料、飲用水微生物污染評估；
◆ 法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)‌：符合中國藥典、美國藥典（2025年更新后強(qiáng)化非無菌產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)）及歐盟標(biāo)準(zhǔn)。

四、關(guān)鍵注意事項‌
◆ 濾膜選擇‌：優(yōu)先使用無菌預(yù)包裝濾膜以減少污染風(fēng)險；非無菌濾膜需獨立滅菌（蒸餾水煮沸15分鐘）；
◆ 操作規(guī)范‌：全程無菌操作，避免濾膜破損或折疊影響計數(shù)精度；
◆ 設(shè)備維護(hù)‌：定期清潔薄膜過濾器和真空泵，防止交叉污染。
 
膜過濾法因其高靈敏度和抗干擾能力，已成為微生物檢測的主流技術(shù)，尤其在制藥與高衛(wèi)生要求行業(yè)具有不可替代性。

以下是微生物換膜過濾器配套真空泵的選型要點及推薦方案：

一、核心選型標(biāo)準(zhǔn)
1、無油防污染設(shè)計‌
微生物檢測需避免油霧污染，優(yōu)選干式無油真空泵（如隔膜泵、活塞泵）
特殊場景（如有機(jī)溶劑過濾）可選用耐腐蝕隔膜泵（如Rocker400C）
2、適配流量與真空度‌
常規(guī)檢測推薦真空度：-0.08 ~ -0.1 MPa
流量需求：≥20 L/min（配合多聯(lián)過濾器需更高流量）

二、主流方案對比

1、活塞式真空泵‌ Lafil400-SF10 一體化設(shè)計減少臺面占用，支持SUS316不銹鋼滅菌 實驗室常規(guī)微生物檢測（如水質(zhì)分析）
2、直排水式隔膜泵‌ WaterVac101-MB 12V移動電源供電，含PES接收瓶組便于野外采樣 應(yīng)急檢測/現(xiàn)場快速篩查
3、多聯(lián)應(yīng)用泵‌ MultiVac301-MB-A 三孔并聯(lián)結(jié)構(gòu)，支持同時處理多個樣本 高通量檢測（如食品工業(yè)質(zhì)檢）
三、關(guān)鍵配置要求

1、材質(zhì)兼容性‌
過濾漏斗需采用SUS316不銹鋼（耐高溫滅菌）
接收瓶建議選用PES材質(zhì)（抗化學(xué)腐蝕）或PP材質(zhì)及玻璃材質(zhì)

2、安全防護(hù)裝置‌
必須配備緩沖杯+阻水濾器雙重防護(hù)，防止液體倒吸損壞泵體
多聯(lián)過濾器需配置獨立控制閥，避免交叉污染

四、維護(hù)建議
◆ 每月用75%乙醇沖洗管路，保持微生物檢測潔凈度
◆ 通過匹配樣本處理量（單次過濾量50-1000ml）和檢測環(huán)境（實驗室/野外），可參考上述方案快速鎖定適配機(jī)型。