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奶及奶制品中黃曲霉素M1專業(yè)解決方案

瀏覽次數(shù):1276 發(fā)布日期:2012-1-4  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
泰樂祺科技 推出奶及奶制品中黃曲霉素M1專業(yè)解決方案-
     針對近日來國家質(zhì)檢總局公布了的蒙牛乳業(yè)(眉山)和福建長富純牛奶抽查的產(chǎn)品被檢出黃曲霉毒素M1超標(biāo)的問題。蒙牛乳業(yè)對此向民眾進(jìn)行了致歉申明,反應(yīng)了民族企業(yè)的責(zé)任心和對食品安全的重視。對于黃曲霉毒素M1的限量,在之前的相關(guān)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中有明確規(guī)定,其中:鮮乳及其乳制品(折算為鮮乳汁)不得超過0.5ug/kg;嬰兒代乳食品不得檢出黃曲霉毒素b1。(GB 2761-2005國家標(biāo)準(zhǔn)—食品中真菌毒素限量 GB 9676-2003國家標(biāo)準(zhǔn)—乳及乳制品中黃曲霉毒素M1限量!
黃曲霉毒素主要存在于谷物、堅果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些與人類血液,動物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。霉菌的生長并不一定表明黃曲毒素的存在,因為黃曲毒素只有在濕度、溫度適合及通風(fēng)良好才會生成。黃曲霉素B類具有藍(lán)色熒光,G類具有綠色熒光。除了蔬菜中常見的(B1,B2,G1,G2),還有存在喂食了有毒飼料的奶牛的牛奶中的黃曲霉素M,其中毒性最高的M的代謝物為4-羥基化的產(chǎn)物Bs.黃曲霉毒素M1是黃曲霉毒素B1的羥基化代謝產(chǎn)物,也是一種強致癌物質(zhì)。其危害巨大,人類日常消費食品中如牛乳及其制品是易受到黃曲霉毒素M1污染的食品之一。黃曲霉毒素的危害性在于對人及動物肝臟組織有破壞作用,嚴(yán)重時,可導(dǎo)致肝癌甚至死亡。毒性是砒霜的100倍其實主要是指黃曲霉毒素比砒霜毒。
目前來講,Aflatoxin M1的檢測方法有高效液相色譜法(HPLC),酶聯(lián)免疫檢測法等。液相色譜法可以精確的檢測奶制品中黃曲霉毒素的微小含量。而使用黃曲霉毒素M1 ELISA試劑盒則能夠快速而準(zhǔn)確的分析樣品中黃曲霉毒素M1殘留。
作為國內(nèi)專業(yè)從事霉菌毒素檢測技術(shù)與產(chǎn)品服務(wù)的主要供應(yīng)商, 2010年泰樂祺科技投巨資成立了"檢測應(yīng)用實驗室",重點關(guān)注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等檢測技術(shù)問題,以期望快速提出解決方案。近期應(yīng)針對奶中出現(xiàn)的黃曲霉毒素M1超標(biāo)問題,泰樂祺科技提供了兩種檢測方案,可以幫助企業(yè)輕松應(yīng)對奶中黃曲霉毒素M1的限量檢測。
 
高效液相色譜法:
根據(jù)國標(biāo)《GB 5413.37—2010》食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)乳和乳制品中黃曲霉毒素M1 的測定
 實驗用前處理:
實驗儀器和好耗材包括:
恒溫水浴鍋 溶劑過濾器(帶真空泵)1000ml  高速勻質(zhì)器 黃曲霉毒素免疫M(jìn)1親和柱玻璃纖維濾紙 玻璃注射器 無熒光特性玻璃試管 空氣壓力泵 超聲波清洗機  定量濾紙 量筒 樣品瓶 容量瓶 移液器或移液管
  實驗用試劑:色譜乙腈色譜甲醇 氫氧化鈉 石油醚 超純水或去離子水等等
HPLC條件:
高效液相色譜儀
 
色譜柱
C18柱,150*4.6mm,5um
流動相
乙腈-水(25:75)
熒光檢測器:
激發(fā)波長365nm,發(fā)射波長435nm;
柱  溫
室溫
流速
1.0ml/min
進(jìn)樣量
20ul
出峰時間
10分鐘左右
 
樣品取樣:真菌毒素分析的最大誤差來源是樣品的收集和取樣過程,所以必需保證樣品收集和取樣具有代表性。
樣品前處理:分不同樣品
牛奶  水浴加熱至40度,離心用上清液過柱凈化;
乳粉和粉狀嬰幼兒配方食品:稱取適量奶粉樣品,用于蒸餾水中,混合均勻使其充分溶解,離心離心用上清液過柱凈化;
發(fā)酵乳(包括固體狀、半固體狀和帶果肉型)稱取適量奶粉樣品,用于蒸餾水中,調(diào)節(jié)PH值至微堿性,高速均質(zhì)器勻漿,水浴加熱后離心,取上清液混合均勻使其充分溶解,離心離心用上清液過柱凈化;
干酪:稱取適量切細(xì)或粉碎,過篩用加純水溶解,高速均質(zhì)器勻漿,超聲提取后收集上清液,然后用石油醚進(jìn)行兩次萃取,然后用適宜的有機溶液萃取,取若干上清液過柱凈化
奶粉樣品,用于蒸餾水溶解中,調(diào)節(jié)PH值至微堿性,水浴加熱后離心,取上清液混合均勻使其充分溶解,離心離心用上清液過柱凈化;
奶油:稱取適量加甲醇水溶解,震蕩后分頁漏斗取下層溶液,蒸干后溶于水用于過柱凈化。
免疫柱凈化步驟:完全符合GB/T 18980-2003
┅┅取出免疫親和層析柱, 恢復(fù)至室溫,將上方塞子取出斜剪斷,再插回親和柱上。
┅┅將免疫親和柱連接于玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取清澈液注入玻璃注射器;
┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約2-3mL/min流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;
┅┅更換玻璃注射器與親和柱連接,在注射器中加入10ml水,調(diào)節(jié)壓力使水以約6mL/min流速清洗親和柱。
┅┅準(zhǔn)確加入4mL色譜級乙腈洗脫,流速為1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測。
:收集管中的洗脫液即為純化后的樣品,可直接用ELISA,熒光和高效液相等方法檢測。
HPLC 檢測需要儀器與耗材
產(chǎn)品名稱
說明
規(guī)格
黃曲霉毒素M1固體標(biāo)準(zhǔn)品
參比對照使用
100ug 1mg  
黃曲霉毒素M1液體標(biāo)準(zhǔn)品
濃度0.5ug/ml, 溶于乙腈
1ml 
PriboFast 黃曲霉素M1免疫親和柱
用于 樣品前處理柱 分析黃曲霉素
25/50T
PriboFast泵流操作架(8位)
用于免疫親和柱凈化樣品處理,方便控制流速
 
黃曲霉毒素檢測專用玻璃纖維濾紙
用于去除HPLC檢測時部分雜峰,有效提高靈敏度。110,1.5um
100P
 
不銹鋼均質(zhì)器
 高速勻漿樣品,有效提高萃取效率
 
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀-超聲波發(fā)生器
 
 
酶聯(lián)免疫檢測法:符合國家標(biāo)準(zhǔn)
酶聯(lián)免疫檢測法采用競爭ELISA,在微孔板上預(yù)包被黃曲霉毒素B1抗原,加入樣本(或黃曲霉毒素M1標(biāo)準(zhǔn)品溶液)及辣根過氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素M1抗體。樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的黃曲霉毒素M1與預(yù)包被在板孔上的黃曲霉毒素M1抗原競爭結(jié)合辣根過氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素M1抗體。未結(jié)合的酶標(biāo)抗體在洗滌時被除去。再加入TMB顯色液,讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素M1抗原的含量成負(fù)相關(guān)。對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可得出相應(yīng)殘留物黃曲霉毒素M1的含量。
樣品處理
牛奶 直接離心取上清液用于檢測
奶粉及其他固狀奶制品:需要溶解于去離子水中,離心取上清液用于檢測
試劑盒檢測時間:30分鐘+30分鐘
交叉反應(yīng)率:
Aflatoxin M1
100%
Aflatoxin B1
8%
Aflatoxin B2
10%
Aflatoxin G1
7%
Aflatoxin G2
5%
 
ELISA 方法檢測需要:
 
說明
 
PriboFast 黃曲霉毒素M1酶聯(lián)免疫檢測試劑盒
檢測范圍 (0.1 ppb -8.1ppb)
96孔
雷勃半支滅菌移液器(彩色)
多個量程:0.5-10; 20-200; 5-50; 1000-5000ul
雷勃八道半支滅菌移液器
量程: 5-50ul; 50-300ul
酶標(biāo)儀
進(jìn)口、國產(chǎn)儀器,
  分析人員要求:
化學(xué)分析儀器及其相關(guān)專業(yè)或有高效液相色譜儀操作經(jīng)驗的人員。
 
注:作為面向全球提供霉菌毒素檢測技術(shù)解決方案的主要服務(wù)商之一,PriboLab憑借強大的研發(fā)團(tuán)隊和霉菌毒素檢測技術(shù)的研究,為全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、食品加工與糧食、飼料工業(yè)等行業(yè)提供專業(yè)的真菌毒素檢測技術(shù)產(chǎn)品與技術(shù)服務(wù)。北京泰樂祺作為 PriboLab在中國的唯一合作伙伴,積極為國內(nèi)客戶提供優(yōu)質(zhì)的霉菌毒素檢測技術(shù)與產(chǎn)品服務(wù),為國內(nèi)客戶提供適宜的霉菌毒素檢測方案,幫助國內(nèi)客戶建立高效優(yōu)質(zhì)的霉菌毒素項目檢測平臺。
 
 
 
發(fā)布者:青島普瑞邦生物工程有限公司
聯(lián)系電話:17657127618
E-mail:info@pribolab.cn

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beijing (111.194.235.243)
目前霉菌毒素的檢測方法包括薄層色譜法、酶聯(lián)免疫法、免疫親和柱凈化高效液相色譜法。但薄層色譜法操作繁瑣、污染大、定量差、耗時長;而酶聯(lián)免疫法雖操作簡單、靈敏度高,但特異性差,假陽性高;免疫親和柱高效液相色譜法成本太高, 對于高黃曲霉毒素含量的樣品偏差較大。迫切需要一種樣品處理簡便易行、快速準(zhǔn)確、靈敏度高、檢測限低,檢測成本低廉的檢測方法和技術(shù)。尤其液相色譜分離技術(shù)具有分析速度快、樣品用量少、靈敏度高、分離和測定一次完成,得到越來越多行業(yè)和單位的應(yīng)用,然而整個過程樣品前處理的好壞將直接導(dǎo)致測量結(jié)果的準(zhǔn)確與否,對樣品凈化的方法要求更高。Pribolab推出的新一代霉菌毒素凈化柱產(chǎn)品,在創(chuàng)新發(fā)展了霉菌毒素檢測的樣品處理技術(shù)基礎(chǔ)上,可以保證整個檢測一開始就具有較高的重現(xiàn)性和可靠性。 現(xiàn)代前處理技術(shù)在要求凈化效果的同時,越來越追求方法的快速及易操作性,PriboFast○R系列多功能凈化柱采取的方法就是多重機制吸附雜質(zhì)并快速萃取凈化的方法,,它將極性、非極性及離子交換等多類官能基團(tuán)作為復(fù)合吸附填料作為填充劑填充到柱體中,這些填料可以選擇性的吸附樣品中的如脂類、蛋白類和色素等主要雜質(zhì)吸附,同時將待測目標(biāo)物(如中黃曲霉毒素 玉米赤霉烯酮等各種霉菌毒素)留在樣液中,從而達(dá)到凈化和富集的目的。 使用PriboFast○R 系列多功能凈化柱,能夠及時快速地對從食品、飼料、飲料、藥材中提取的待檢液進(jìn)行凈化,過柱凈化后的樣品可以用于檢測黃曲霉毒素、 玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、雪腐鐮刀菌烯醇、3-乙;撗跹└牭毒┐肌15-乙;撗跹└牭毒┐嫉榷喾N霉菌毒素。與一般的固相萃取柱(SPE)和親和柱相比,多功能凈化柱無需活化、上樣、洗脫等步驟,能夠?qū)⑹称坊蝻暳咸崛∫褐械碾s質(zhì)與真菌毒素進(jìn)行一步分離,使用快捷、方便,減少萃取步驟,有效保證分析的更加準(zhǔn)確可靠,降低檢測成本,有效提高檢測效率。  整個操作過程耗時短(30秒左右),而且其適用范圍廣,操作方便,凈化效果好,檢測結(jié)果準(zhǔn)確。在操作過程中,樣品提取液過柱時毒素不被吸附而直接通過,不需要進(jìn)行活化、淋洗和洗脫操作只需直接上樣,短時間內(nèi)即可完成整個凈化過程。回收率可達(dá)到85- 100%,有效降低檢測成本。 PriboFast○R 系列霉菌毒素凈化柱的優(yōu)勢在于整個凈化過程樣品處理簡單,操作簡便易行、快速準(zhǔn)確、靈敏度高,檢測成本低廉, 適合大批量檢測,目前在國內(nèi)的糧油、質(zhì)檢、飼料、監(jiān)察等系統(tǒng)的多個部門試用后反應(yīng)效果良好,認(rèn)為這是實現(xiàn)毒素檢測的有效可行的方法之一。 為進(jìn)一步推廣產(chǎn)品,擴大市場影響力,感謝廣大新老用戶對泰樂祺科技的支持與厚愛,我公司現(xiàn)開展PriboFast®霉菌毒素多功能凈化柱產(chǎn)品的免費申請試用活動。您只要下載填寫產(chǎn)品試用申請表(耗材類),看看什么產(chǎn)品對您的實驗有幫助,然后將產(chǎn)品試用申請單填好后傳真、郵件或郵寄給我公司,我公司將會給您寄出試用裝,歡迎各位老師來電咨詢。 PriboFast®霉菌毒素多功能凈化柱試用產(chǎn)品包括: PriboFast®M260多功能凈化柱 用于黃曲霉毒素 玉米赤霉烯酮PriboFast®M200多功能凈化柱 適用于嘔吐毒素及其衍生物 雪腐鐮刀菌烯醇等毒素 北京泰樂祺科技有限公司目前提供食品安全檢測相關(guān)產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),尤其專注于霉菌毒素分析系列產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),依托國外先進(jìn)技術(shù)為社會提供食品、飼料及飲料等的霉菌毒素、食品成分等檢測分析服務(wù)。 ☆ 霉菌毒素檢測技術(shù)咨詢與產(chǎn)品服務(wù) 包括:標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)(質(zhì)控樣品)、樣品前處理凈化柱和免疫親和柱、ELISA試劑盒 ☆ 酶法生物分析試劑盒(液體裝)及葡萄酒專用酶法試劑盒 ☆ 動物疾病金標(biāo)檢測卡和ELISA檢測試劑盒 ☆ 農(nóng)藥、環(huán)境污染物質(zhì)等樣品前處理凈化柱 ☆ 農(nóng)獸藥食品標(biāo)準(zhǔn)品以及固相萃取小柱、濾膜、針式過濾器等色譜耗材 ☆ 霉菌毒素、有機酸、糖類物質(zhì)等檢測分析 北京泰樂祺科技有限公司 www.rapid-bio.com 聯(lián)系電話:010-63395349 63380700 13311089404 如有更多產(chǎn)品需求與查詢,請及時接洽:www.rapid-bio.com 或在我公司查詢主頁客戶留言處(http://www.rapid-bio.com/NetBook.asp#)留下您的查詢內(nèi)容,我們即會在當(dāng)天為您作出回復(fù)。
2012-4-26 16:08:00
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