脂肪干細胞的有效分離、培養(yǎng)及保存方法

      近日，經(jīng)研究人員試驗發(fā)現(xiàn)，旨在分離、培養(yǎng)和凍存大鼠脂肪干細胞，并對其相關(guān)的細胞表型進行研究，為利用脂肪干細胞治療梗阻性腎*腎纖維化等實驗提供依據(jù)。研究指出，建立了一種脂肪干細胞的有效分離、培養(yǎng)及保存方法，并對其表面標志物進行鑒定，為利用脂肪干細胞進行進一步的實驗研究提供了依據(jù)。

     取大鼠3只，經(jīng)消毒麻醉，采集其腹股溝處脂肪組織分離培養(yǎng)其中的脂肪干細胞，用相差倒置顯微鏡觀察細胞生長方式及形態(tài)變化。取第三代細胞用流式細胞儀作細胞免疫表型的鑒定。凍存復蘇后再次檢測干細胞生長情況及表型。

      大鼠脂肪組織中含有大量間充質(zhì)干細胞，原代培養(yǎng)的ASCs呈小圓形或星形，經(jīng)傳代后的脂肪干細胞形態(tài)比較均一，呈長梭形，個別略呈多角形、漩渦樣生長。其細胞表型為CD29、CD44高表達，CD73、CD105中等程度表達，CD34極低表達。脂肪干細胞經(jīng)低溫凍存3個月，復蘇后，生長活力和存活率與凍存前未見明顯區(qū)別，CD44和CD29檢測與凍存前表達率也一致。