新冠突變型重組N蛋白及其相關(guān)抗體

2021年7月2日，世界衛(wèi)生組織敦促各國(guó)領(lǐng)導(dǎo)人通過(guò)增加疫苗接種工作和公共衛(wèi)生措施來(lái)遏制新冠病例“令人生畏”的激增。他警告說(shuō)，隨著德?tīng)査�變種迅速成為許多國(guó)家的主要新冠毒株，“我們處于這場(chǎng)疾病大流行非常危險(xiǎn)的階段”。世衛(wèi)組織應(yīng)對(duì)新冠大流行的技術(shù)負(fù)責(zé)人范克爾科夫提醒說(shuō)，德?tīng)査�變體自首次出現(xiàn)以來(lái)一直在演變，會(huì)有更多的突變，會(huì)檢測(cè)到更多的變異，其中一些將是值得關(guān)注的變異。

冠狀病毒最主要的結(jié)構(gòu)蛋白之一——棘突蛋白（Spike或簡(jiǎn)稱(chēng)S蛋白）是疫苗研究的靶抗原，無(wú)論是傳統(tǒng)滅活疫苗、重組蛋白疫苗、腺病毒載體疫苗或mRNA疫苗等都是以S蛋白為重要的免疫靶抗原，激活人體免疫系統(tǒng)，從而對(duì)抗未來(lái)可能入侵的新冠病毒。然而新冠病毒連續(xù)不斷突變，不僅對(duì)接種的疫苗產(chǎn)生抗藥性，更危險(xiǎn)的是新變種可加速在人們之間的傳播速度，因而我們需要比病毒傳播速度更快地采取行動(dòng)，控制并消滅新冠病毒，避免更強(qiáng)突變株的流行。

2020年9月11日，高福院士團(tuán)隊(duì)揭示了新冠病毒N蛋白這一重要檢測(cè)靶點(diǎn)和藥物靶點(diǎn)的結(jié)構(gòu)特征，為特異性靶向N蛋白的免疫快速診斷方法及抑制劑的開(kāi)發(fā)提供了理論依據(jù)。N蛋白是冠狀病毒中含量最豐富蛋白，具有高度保守性，但隨著新冠病毒不斷突變，出現(xiàn)了多種流行株，N蛋白也發(fā)生了多個(gè)位點(diǎn)的突變（如圖1）。不斷突變的N蛋白促使我們對(duì)病毒檢測(cè)方法的升級(jí)，給疫情防控也帶來(lái)了嚴(yán)重挑戰(zhàn)。

一直致力于新冠N、S蛋白抗原和抗體的研發(fā)，不斷優(yōu)化，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的篩選及驗(yàn)證，開(kāi)發(fā)出可應(yīng)用于膠體金、免疫熒光、ELISA、WB等多種方法研究的抗原及抗體。

廣譜性抗N蛋白單克隆抗體，可識(shí)別多種已發(fā)現(xiàn)主要突變位點(diǎn)的重組N蛋白，可用于新冠N蛋白抗原檢測(cè)試劑開(kāi)發(fā)（如圖2）。

圖2.Western Blot of McAb(Cat#)to recombinant SARS-CoV-2(2019-nCoV)nucleocapsid proteins(NP)

Lane1:SARS-CoV-2 N protein(WT) at 10ng;

Lane2:SARS-CoV-2 N protein(Q9H, P67S, P80R, P151L, S183Y) at 2ng;

Lane3:SARS-CoV-2 N protein (D3L, P13T, D103Y, D128Y, H145Y, R203K, G204R, T205I, S235F) at 2ng;

Lane4:SARS-CoV-2 N protein(Del204 & Del215) at 2ng;

Lane5:SARS-CoV-2 N protein(R203M & D377Y) at 2ngPrimary:Anti-SARS-CoV-2 N protein at 1/1000 dilutionsecondary:IRDye800CW Goat Anti-Mouse IgG at 1/20000 dilutionPredicted band size:46kDObserved band size:46kD

新一代新冠N蛋白配對(duì)抗體，用于新冠病毒SARS-CoV-2(2019-nCoV)抗原檢測(cè)。

圖3.新冠N抗原檢測(cè)試劑經(jīng)重組N蛋白驗(yàn)證結(jié)果

新冠滅活病毒質(zhì)控驗(yàn)證（委托檢測(cè)）：

圖4.新冠N抗原檢測(cè)試劑經(jīng)病毒質(zhì)控驗(yàn)證結(jié)果