分光光度法與衡量法在移液器校準中的優(yōu)劣探討（下）

什么是分光光度法校準？

我們先來了解一下究竟什么是分光光度法，請看下面的原理圖：（以下圖片略）

分光光度法校準原理是將混合有特殊物質(zhì)的液體____溶劑(英文solution)，通過移液器量取后注入目標容器內(nèi)，然后通過使用特定的濾波片過濾掉一部分不需要的波長的光后，再對剩余的特定的波長的光進行測量，從而由此計算出移液器實際吸取和排出的液體�？v觀分光光度法校準的原理可見，在采用分光光度法對移液器校準的過程中，可能對校準結(jié)果帶來影響的因素主要有：

1 溫度，因為分光光度法同樣需要使用到液體即溶劑，一定量的溶劑，其容積同樣受到溫度的影響而變化；

但如果在用戶所在的場所對其移液器進行校準，則此影響可以不計，因為，某一個具體用戶所在的場所內(nèi)的溫度變化，相對來說是固定的，那么這種由溫度帶來的對分光光度法校準中容積的影響，同樣也會存在于用戶實際工作中，因此這兩者是可以相互抵消的；

2 氣壓，同溫度帶來的影響一樣，由氣壓帶來的影響也是可以相互抵消的；

3 操作人員的操作習(xí)慣帶來的影響，因為分光光度法是可以被直接在終端用戶使用場所應(yīng)用的一種移液器校準方法，其操作方法相對于傳統(tǒng)的衡量法更為簡單、可靠，因此，完全可有移液器的使用者來直接對其使用的移液器采用分光光度法進行校準，因此，操作者的操作習(xí)慣在校準過程中表現(xiàn)出來的差異同樣存在與今后的使用過程中，因此，這兩者之間的差異也可以相互抵消的；

4 環(huán)境濕度，因為分光光度法不是對移液器排出的溶劑進行稱量，而是對溶劑中所包含的特殊物質(zhì)的光波進行測量，同時，這種特殊物質(zhì)是不可揮發(fā)的，因此在整個測試過程中，其已經(jīng)通過移液器排出的溶劑，無論其質(zhì)量如何變化，但結(jié)果是不會受到影響的，也就是不需要對環(huán)境的干濕度進行控制。

因此，我們幾乎可以說，針對移液器采用分光光度發(fā)進行校準，其整個的測試過程是幾乎不受環(huán)境因素影響的，如溫度、氣壓、干濕度等，同時因在這一校準過程中，校準人和最終使用人是同一人，從而因人的因素而帶來的差異也是降到最低的。

在采用分光光度法對移液器實施校準的過程中，唯一不可被抵消的差異是分光光度法設(shè)備及試劑自身存在的誤差，這與傳統(tǒng)的衡量法里測量儀器自身的誤差一樣，比如電子天平自身的誤差、溫度計自身的誤差、干濕度計一級氣壓計自身的誤差等，但這些來自于測量設(shè)備、溶劑自身的誤差，通常是恒定的，并且是可以事先測量的，可以通過的測量數(shù)據(jù)進行修正的方法來避免的。

當(dāng)然，目前分光光度法作為一種針對移液器校準的新的應(yīng)用方法還是剛剛興起，在國外也只有少數(shù)研究機構(gòu)貨實驗室在使用，在我國國內(nèi)，目前僅僅停留在理論層面的評估上，并沒有在實際中推廣、應(yīng)用。但因為分光光度法不受環(huán)境因素干擾，使得其應(yīng)用環(huán)境更為隨意、寬廣，因此筆者人為，這種新型的針對移液器校準的方法，在不久的將來，將會得到更多用戶的肯定與承認。