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CPG載體助力核酸合成實驗成功率翻倍

瀏覽次數(shù):89 發(fā)布日期:2025-7-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

在科技飛速發(fā)展的當下,分子生物學技術(shù)如強勁引擎,驅(qū)動生命科學領(lǐng)域一路疾馳。核酸藥物研發(fā)、遺傳病與感染性疾病診斷、基因研究等前沿領(lǐng)域,正以前所未有的速度革新突破。每一次研究躍進、每一項精準診斷、每一款創(chuàng)新藥物問世,都離不開大量寡核苷酸的堅實支撐。寡核苷酸合成宛如一場精密“分子盛宴”,固相亞磷酰胺法是這場盛宴的“主廚”,而固相載體則是默默奉獻的“幕后英雄”。

寡核苷酸固相合成流程

在寡核苷酸固相合成中,可控微孔玻璃(CPG)和聚苯乙烯(PS)是應(yīng)用廣泛的“明星選手”。

CPG 載體是“全能戰(zhàn)士”,以二氧化硅為材質(zhì),廣泛應(yīng)用于寡核苷酸固相合成。其球體內(nèi)部如“微觀迷宮”,布滿不規(guī)則孔道且孔徑穩(wěn)定?讖酱笮∨c合成片段長度相關(guān),大孔徑適合長片段合成,能減少空間位阻,提高效率和產(chǎn)率;小孔徑更適合短片段合成,可減少擴散和丟失,保證準確性和純度。此外,CPG 載體生物相容性好,不與生物分子反應(yīng),能保護其活性和結(jié)構(gòu),表面還易于化學修飾,可引入不同功能基團,拓展應(yīng)用范圍。不過,它負載量較低(<100 μmol/g),限制了大規(guī)模合成應(yīng)用。

通用型CPG載體結(jié)構(gòu)

PS 載體是“大力士”,負載量高(350 μmol/g),能輕松勝任大規(guī)模合成,提高生產(chǎn)效率和經(jīng)濟效益,且加工性能好,可制成不同形狀和尺寸顆粒,滿足不同設(shè)備和工藝需求。但它也有缺點,溶脹性高,合成時消耗大量溶劑,增加成本和環(huán)境壓力,還可能導致顆粒團聚,影響反應(yīng)效率和均勻性。

與 PS 載體相比,CPG 載體優(yōu)勢突出:

化學與生物優(yōu)勢:化學穩(wěn)定性極高,極端條件下溶劑效應(yīng)更;生物相容性好,能保護生物分子活性,在需保持生物分子活性的場景中優(yōu)勢明顯。

孔徑與效率優(yōu)勢:孔徑可控,能根據(jù)合成需求選擇不同孔徑產(chǎn)品,精確控制孔徑可優(yōu)化合成條件,減少空間位阻和副反應(yīng),合成較長鏈寡核苷酸時優(yōu)勢更顯著。

機械與特定場景優(yōu)勢:機械強度高,能承受機械操作,保持完整均勻;在 gRNA 合成、引物合成、檢測探針合成和早期藥物篩選等對合成產(chǎn)物純度和質(zhì)量要求高的領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,雖負載量低,但在這些特定場景下成本效益高,能帶來更高實驗成功率和更低后續(xù)處理成本。

一表對比PS和CPG載體:

 
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