PlasDIC—在顯微細胞學中令人折服的創(chuàng)舉

可以允許應用塑料培養(yǎng)皿的偏振光微分干涉技術
PlasDIC—在顯微細胞學中令人折服的創(chuàng)舉

目前現狀在顯微細胞學日常的工作中我們常常遇到厚樣品和活動樣品的觀察問題，尤其是在用相差觀察厚的物體時問題更為突出，重所周知在這種觀察條件時只能得到帶“光暈”的圖象信息。
Nomarski DIC(微分干涉)技術可以對付細胞團或者組織等較厚的樣品，但它是昂貴的并且僅僅只能應用在玻璃底的培養(yǎng)皿中，當然這種技術在日常應用中最大的問題還是景深不足。
另外一些技術也可以用于厚樣品的觀察，例如基于斜照明原理的Hoffmann技術，不過這種技術調節(jié)十分困難并且存在測量誤差。

來自ZEISS公司的PlasDIC技術
與現在的透射光干涉技術不同，PlasDIC技術無需在聚光鏡中裝補償棱鏡，因此樣本是被自然光（例如非偏振光）照射；只有當經過DIC 棱鏡之后的光才產生偏振，接著檢偏器讓通過的光線在樣品平面產生振動并干涉；當聚光鏡上狹縫光闌設定在λ/4，將呈現清晰的干涉圖象；這種對比是可以變量調節(jié)的（它可以根據相應的物體而變化）。這在顯微鏡學中是首次相干和偏振的完美組合，它將整個樣品區(qū)域的位置置于偏光敏感區(qū)域之外；PlasDIC技術也是第一個允許應用塑料培養(yǎng)皿的偏振光微分干涉技術。
結果和評估

下圖中顯示的是相同區(qū)域的HEK（人胚腎）細胞在相差（左）和 PlasDIC技術（右）的觀察效果。我們能夠清楚的看到使用相差觀察時，由于“光暈”現象，細胞較厚的區(qū)域的重現性是十分糟糕的；而如果在圖象中有超過85%以上的區(qū)域為較厚細胞時這個問題將非常嚴重。而圖2右中使用PlasDIC技術，不管觀察區(qū)域樣品是薄還是厚都可以得到漂亮重現的影象，并產生浮雕效果；因此可以得到更重要的細節(jié)特征。
結論：
A． 因為無須調中和變換光闌，使用PlasDIC技術的顯微鏡操作也更加方便，所以也不容易出錯。
B． 它僅使用標準的物鏡，在聚光鏡上也不需要棱鏡，有更高性價比。
C． 不需要使用帶玻璃底的塑料培養(yǎng)皿，普通塑料培養(yǎng)皿即可。
所有以上諸點說明，PlasDIC技術活細胞顯微觀察的最佳工具。

ZEISS 倒置顯微鏡都可以應用這個新技術.歡迎咨詢:

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