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科潤(rùn)達(dá)生物推出一步裂解法全血基因組DNA純化試劑

瀏覽次數(shù):1348 發(fā)布日期:2009-12-8  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處
一步裂解法全血基因組DNA提取試劑簡(jiǎn)介
1.本試劑盒技術(shù)指標(biāo)
 
·         試劑盒由單管紅細(xì)胞及細(xì)胞核復(fù)合裂解液、蛋白沉淀液以及DNA溶解液組成。
·         可以同時(shí)從全血中提取人基因組DNA、線(xiàn)粒體DNAmtDNA)以及病毒DNA。
·         整個(gè)提取過(guò)程不超過(guò)45分鐘。
·         全血基因組提取過(guò)程包括:1裂解紅細(xì)胞及有核白細(xì)胞。2鹽析沉淀蛋白,分離基因組。3異丙醇沉淀脫鹽并濃縮。4 70%乙醇清洗,晾干并用DNA溶解液溶解。
·         本試劑盒采用單管紅細(xì)胞及細(xì)胞核復(fù)合裂解液,省去了第一代產(chǎn)品的裂解并去除紅細(xì)胞的步驟,其中含有抑制DNA酶的成分,在加熱(65°C)狀態(tài)下,可保證完整的人基因組DNA、線(xiàn)粒體DNAmtDNA)以及病毒DNA的充分裂解釋放,異丙醇沉淀時(shí),罕見(jiàn)渾濁的蛋白質(zhì)雜質(zhì)的共沉淀。
·         用于DNA提取的全血應(yīng)為抗凝血(EDTA, 肝素或檸檬酸鈉抗凝),抗凝血在-20°C存放一個(gè)月以?xún)?nèi),避免反復(fù)凍融, 4°C存放7天以?xún)?nèi),均能純化出高質(zhì)量的DNA。-80°C條件下,樣本至少可存放2年。
·         本試劑提取的基因組DNA長(zhǎng)度大于20kb, 可用于PCR擴(kuò)增、內(nèi)切酶消化以及膜雜交等。
·         試劑盒在室溫下保存1年。
 
2. 操作流程:

DNA 溶解液溶解
200ul,70%乙醇清洗
單管全血100ul與裂解液加熱(65°C)裂解20分鐘
200ul蛋白沉淀液,離心沉淀
取上清,加等量異丙醇,離心沉淀,棄上清

 
3.一步裂解法全血基因組DNA提取試劑與promega全血基因組DNA提取試劑的比

    

 

10個(gè)100ul,-20°C保存1周的全血樣本分別用promega試劑(1、2、3號(hào)樣本)以及一步裂解法全血基因組DNA提取試劑(4-10號(hào)樣本)純化的基因組DNA電泳。11號(hào)為λ/HinderIII分子量 marker。

 



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