特別提示:包括大孔中性樹脂CAD-40在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:大孔中性樹脂CAD-40
產品貨號:Y15147
產品規(guī)格:500G
儲存條件:RT
外觀:顆粒
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名稱:鈉型732陽離子交換樹脂
貨號:QN4049
規(guī)格:500g
鈉型732陽離子交換樹脂的使用方法:
1.樹脂預處理。
732樹脂是強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂,新樹脂在使用前,需進行予處理。將準備裝柱使用的新樹脂,先用70-80℃的熱水(清潔的自來水即可)反復清洗。開始浸洗時,每隔約15分鐘換水一次,浸洗時要不時攪動,換水4-5次后,可隔約30分鐘換水一次,總共換水7-8次,浸洗至浸洗水不帶褐色,泡沫很少時為止。也可用10%氯化鈉溶液浸泡樹脂24小時,然后用清水沖洗至洗水無色為止。
2.酸處理。
酸處理最好在交換柱中進行,先用濕法裝柱法將樹脂放入柱內。用1N鹽酸緩慢流過樹脂,用量約為強酸陽樹脂體積的2-3倍,每小時1.5倍床層體積流過。酸進完后,再浸泡1小時左右。然后用水沖洗,至出水PH為5左右為止。
3.堿處理。
用1N NaOH流過樹脂,用量及流速與1相同。堿進完后,同樣再浸泡1小時左右。然后用水沖洗,至出水PH為9左右為止。
4.轉型。
若需用H型,則用1N鹽酸或硫酸,將樹脂轉成H型,用量為樹脂體積的3-5倍,流速與1相同。酸流完后,用去離子水沖洗至出水PH值為6以上時,即可投入使用。
若用Na型,則不必轉型,于堿處理完成后,即可投入使用。但沖洗樹脂用水需用去離子水。
5.再生。
再生前,先將樹脂反洗至出水無色透明。
H型樹脂用1N HCL、Na型樹脂用1N NaoH(也可用8%的NaCL溶液)過柱,用量為柱脂體積的2-3倍,流速為每小時1倍床層體積。
再生液過完后,用去離子水洗柱至出水至中性,即可再次投入使用。
儲存條件:RT
名稱:蛋白A瓊脂糖凝膠親和層析介質
貨號:QN4053
規(guī)格:2ml
名稱:丁基-瓊脂糖凝膠4FF
貨號:QN4075
規(guī)格:25ml
丁基-瓊脂糖凝膠4FF是將丁基鍵合在瓊脂糖凝膠4FF上形成的一種可利用疏水相互作用來實現(xiàn)目標產品純化分離的疏水類介質。用于生物大分子和乙肝疫苗的純化分離。本品為白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質。
理化指標:
項目 |
指標 |
配基 |
丁基 |
基質 |
4%交聯(lián)瓊脂糖凝膠 |
形狀 |
球形 |
粒徑 |
45~165μm |
配基密度 |
40 μmol/ml介質 |
最高流速(25℃) |
100KPa下200cm/h* |
耐壓 |
0.2MPa |
工作溫度 |
4~40℃ |
pH適用范圍 |
2~14(短時間,在位清洗);3~13(長時間) |
化學穩(wěn)定性 |
以下溶液中穩(wěn)定:pH3~12.5中穩(wěn)定;0.1% triton水溶液和1% MOPS溶液中穩(wěn)定;5%甲醛中基本穩(wěn)定 |
*柱子:內徑16mm、柱長10cm,柱床高5cm,25℃,流動相為0.1mol/L NaCl。
包裝:產品以無菌試劑瓶密封包裝,外貼標簽,注明“品名、體積、顆粒大小、應用、生產單位”等內容。所選用的包裝應有利于保證產品質量、方便運輸和貯存。
運輸:運輸中應避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
貯存:產品應密封貯存在4~30℃(保存溶液為20%乙醇+0.1M醋酸鈉),通風、干燥、清潔的地方,不能冷凍,保質期5年,用過的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。
使用過程:
1.裝柱
① 讓所有的材料和試劑達到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。
② 根據柱子大小取所需量的凝膠,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
③ 將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。
④ 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
⑤ 打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2.平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液,如0.02~0.05mol/L的PBS加1~2.5mol/L(NH
4)
2SO
4等。
3.上樣
① 樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。&
② 一般情況是讓目標產品結合在柱子上,用平衡液洗去雜質,再選擇一種洗脫液洗下目標產品。
③ 介質對樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質、流動相的離子強度和溫度。鹽濃度大、溫度高或樣品組分疏水性強,介質對組分吸附牢。
4.洗脫
疏水介質可用減小鹽濃度進行洗脫。加表面活性劑或有機溶劑可加強洗脫。最常用的洗脫液是低鹽濃度緩沖液,如0.02~0.05mol/L的PBS。
5.再生
一般用低鹽濃度的緩沖液洗,洗10倍以上柱體積,接著用結合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
6.在位清洗
① 對于以離子鍵結合上去的蛋白,可以用2M NaCl去除。
② 對沉淀蛋白、對以疏水性結合的蛋白或脂類,可用1M NaOH去除。
③ 對強疏水性結合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產生氣泡。
清洗完畢后,用至少3倍緩沖液平衡柱子。
7.注意
在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。
8.去熱源
用0.5M的清洗柱子5~6小時或用0.1M的24小時;蛴靡韵路椒ú襟E去除:
① 2倍柱體積的70%乙醇;
② 2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;
③ 1倍柱體積4M尿素;
④ 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M NaCl;
上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。
9.消毒用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。
特別注意:上樣之前,樣品必須去除色素,否則色素會被吸附到填料上,影響填料的正常使用。
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25ml |
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葡聚糖凝膠G-150 |
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雙交聯(lián)瓊脂糖凝膠6B FF |
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