FokI限制性內(nèi)切酶

特別提示：包括FokI限制性內(nèi)切酶在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：FokI限制性內(nèi)切酶
英文名稱：FokI Restriction Endonuclease
產(chǎn)品貨號：SV0373
產(chǎn)品規(guī)格：5KU|1KU|500U

在不同反應(yīng)緩沖液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 75%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重組酶。
反應(yīng)條件:
CutSmart 緩沖液，37℃。
熱失活:65℃ 20 分鐘。
濃度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
對 dcm 和哺乳動物 CpG甲基化敏感。
注意事項:
通過在切割序列中構(gòu)建一對互補(bǔ)的寡核苷酸，F(xiàn)okl 可以在任意兩個核苷酸之間進(jìn)行切割(Podhajska, A. and Szybalski,W.(1985) Gene 40,169–182)。建議消化每 μg DNA，酶量不大于 5 個單位，反應(yīng)時間不超過 2 個小時。
如下條件可能出現(xiàn)星號活性:延時酶切、高酶濃度或甘油濃度＞5%。

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名稱：M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)(逆轉(zhuǎn)錄酶)
貨號：YT393
規(guī)格：2000U
本品是一種經(jīng)過改造和優(yōu)化的M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)。和普通的M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶相比，M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)也是一種依賴于RNA或DNA模板的DNA聚合酶，可以以RNA或DNA為模板在引物存在的情況下完成互補(bǔ)DNA鏈的合成；但缺失了Ribonuclease H(RNase H)酶活性，不能夠選擇性剪切RNA和DNA雜合雙鏈中的RNA。M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)是最常用的反轉(zhuǎn)錄酶之一。

特點：M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)可以合成長達(dá)13kb的cDNA，而普通的M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)僅能合成長達(dá)9kb的cDNA；M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)的最適反應(yīng)溫度為42-45℃并且在55℃時仍然有很高活性，可以避免普通的M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)在37℃反應(yīng)時的一些不足。

用途：M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)常用于在獲得總RNA或mRNA后cDNA第一條鏈的合成。M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)合成的cDNA第一條鏈后續(xù)可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二條鏈的合成等。M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)也可以用于DNA探針的標(biāo)記，通過引物延伸(primer extention)來分析RNA，以及用于基因芯片熒光探針的標(biāo)記。

來源：本M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)由大腸桿菌表達(dá)，表達(dá)的基因為經(jīng)過突變優(yōu)化的編碼Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase的pol基因片段。

活性定義：One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTMP into a polynucleotide fraction in 10 min at 37℃. Enzyme activity is assayed in 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 6 mM MgCl2, 10 mM DTT, 40 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。

純度：不含DNA內(nèi)切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以滿足常規(guī)反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一條鏈等的需要。

酶儲存溶液：50 mM Tris, pH 8.3, 100mM NaCl, 1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。

Reaction Buffer(5X)：250 mM Tris, pH 8.3 at 25℃, 250 mM KCl, 20 mM MgCl2, 50 mM DTT。

失活或抑制：70℃孵育10分鐘可以導(dǎo)致M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)失活；EDTA、EGTA等螯合劑、無機(jī)磷酸鹽或焦磷酸鹽以及聚氨(polyamine)對M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)有抑制作用。

本產(chǎn)品中M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)的濃度為200U/μl，用于體積為20微升的反轉(zhuǎn)錄體系時足夠進(jìn)行10次反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

儲存條件：-20℃。

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