豬圓環(huán)病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒

特別提示：包括豬圓環(huán)病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：豬圓環(huán)病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒
英文名稱：Porcine Ctrcovirus Type 2(PCV2) PCR Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BTN11-4260
產(chǎn)品規(guī)格：50次

豬圓環(huán)病毒II型(Porcine Circovims Type 2，PCV2)是豬圓環(huán)病毒(porcine circovirus PCV)的一個(gè)基因型，該病毒體積小，病毒粒子為20面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)，無囊膜，細(xì)胞培養(yǎng)不產(chǎn)生細(xì)胞病變。病毒基因組是一種環(huán)狀、單股、負(fù)鏈DNA，以滾環(huán)方式復(fù)制。研究表明，PCV2與豬的多種疾病有關(guān)，是斷奶仔豬多系統(tǒng)綜合征(PMWS)的主要病原，且與母豬流產(chǎn)、先天性震顫 (CT)、育肥豬的慢性呼吸道病綜合征(PRDC)、豬皮炎和腎病綜合癥(PDNS)等疾病有關(guān)。PCV1無致病性，廣泛存在于豬群。目前將PCV2引發(fā)的相關(guān)疾病總稱為圓環(huán)病毒相關(guān)病(PCV2 associated diseases，PCVAD)，該病對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的影響越來越大，造成的經(jīng)濟(jì)損失越來越多。

因此有必要建立一種準(zhǔn)確、快速、靈敏的檢測方法對(duì)其進(jìn)行監(jiān)控。本產(chǎn)品即是基于PCR方法對(duì)豬圓環(huán)病毒II型PCV2的快速檢測試劑盒。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板，操作簡單。
2. 預(yù)期的PCR產(chǎn)物長度為494bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品組成：

組分	編號(hào)	規(guī)格(50T)
用型PCR MIX 3.0	BTN90805	1.5mL
PCV2專一性引物對(duì)	yw12851286	100 μL
PCV2陽性對(duì)照	yw12871288	50 μL
超純水	BTN100935	1mL

保存條件：-20℃保存，有效期12個(gè)月。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN11-170602	豬流感病毒H1亞型RT-PCR檢測試劑盒	50次
BTN14-69400	鴿皰疹病毒1型(CHV-1)熒光定量PCR試劑盒(染料法)	50次
BTN14-64810	登革病毒1型(DENV)熒光定量RT-PCR試劑盒(染料法)	50次
BTN14-15700	甲型肝炎病毒(HAV)熒光定量RT-PCR試劑盒(染料法)	50次
BTN13-10200	丁型肝炎病毒(HDV)RT-PCR試劑盒	50次
BTN14-64120	單純皰疹病毒2型(HSV)熒光定量PCR試劑盒(染料法)	50次

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名稱：輪狀病毒A/B/C分型三重?zé)晒釶CR檢測試劑盒
貨號(hào)：SYA217
規(guī)格：48次/盒

名稱：O型\A型\Asia1型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR檢測試劑盒
貨號(hào)：BTN11-1770
規(guī)格：50次
口蹄疫是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的多種偶蹄動(dòng)物高度接觸性傳染病�？谔阋卟《緦儆谛『颂呛怂岵《究瓶谔阋卟《緦�，病毒基因組為單股正鏈RNA，約含8500個(gè)核苷酸。目前已知該病毒有7個(gè)血清型，分別為O、A、C、Asia1、SAT1、SAT2和SAT3，每種血清型包括多個(gè)亞型，各型之間無交叉保護(hù)。我國及周邊國家流行O型、A型和Asia1型3種血清的FMDV，對(duì)FMDV進(jìn)行準(zhǔn)確定型和遺傳變異分析，是FMD疫苗選擇和防控措施制定的重要依據(jù)。為此，本公司建立了一種能擴(kuò)增O型、A型和Asia1型3種血清型FMDV的通用RT-nPCR方法，靈敏度高，特異性強(qiáng)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 通用性強(qiáng)，可用于O型、A型和Asia1型3種血清型FMDV的定性鑒定檢測和分子流行病學(xué)調(diào)查。
2. 能對(duì)樣品中FMDV進(jìn)行快速檢測，具有良好的特異性和敏感性。
3. 結(jié)合擴(kuò)增產(chǎn)物的克隆測序技術(shù)，可對(duì)FMDV進(jìn)行準(zhǔn)確分型。
4. 使用一管式RT-PCR試劑盒，減少了操作步驟，降低了操作誤差。

產(chǎn)品組成：

組分	編號(hào)	規(guī)格
雙酶一管式RT-PCR Buffer，2×	BTN91202A	750 μL
MMLV-Taq Mix	BTN91202B	100 μL
即用型PCR Mix 3.0	BTN90805	1.5mL
通用FMDV專一性引物對(duì)一	yw13151316	100 μL
通用FMDV專一性引物對(duì)二	yw13171318	100 μL
通用FMDV陽性對(duì)照	yw13191320	50 μL
超純水	BTN100935	1mL

保存條件：-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、樣品RNA的制備
用自選方法純化FMDV樣品的RNA，也可以另購本公司的一管式病毒RAN提取試劑盒(BTN3073)或柱式病毒RNA(BTN71001)提取試劑盒，上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。

二、陽性對(duì)照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 使用本陽性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

三、設(shè)置RT-nPCR反應(yīng)
(一) 第一次RT-PCR：
3. 在PCR管中加入下列成分(30μl體系)：

成 份	樣品	陽性對(duì)照	陰性對(duì)照
雙酶一管式RT-PCR Buffer，2×	15μl	15μl	15μl
通用FMDV專一性引物對(duì)一	2μl	2μl	2μl
樣品RNA	1-5μl	無	無
通用FMDV陽性對(duì)照	無	2μl	無
補(bǔ)超純水到	28μl	28μl	28μl
MMLV-Taq Mix	2μl	2μl	2μl

4. 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行RT-PCR：

過程	溫度	時(shí)間
逆轉(zhuǎn)錄	60℃	30分鐘
預(yù)變性	95℃	5分鐘
PCR反應(yīng) (30個(gè)循環(huán))	94℃	30s
	58℃	40s
	72℃	1分鐘
延伸	72℃	5分鐘

5. 電泳檢測RT-PCR產(chǎn)物。預(yù)期的PCR產(chǎn)物長度為1187 bp。
(二) 第二次PCR：
6. 在PCR管中加入下列成分(25μl體系)：

成 份	樣品	陽性對(duì)照	陰性對(duì)照
通用FMDV專一性引物對(duì)二	2μl	2μl	2μl
第一次RT-PCR產(chǎn)物	1-2uL	無	無
通用FMDV陽性對(duì)照	無	2μl	無
補(bǔ)超純水到	12.5μl	12.5μl	12.5uL
即用型PCR Mix 3.0	12.5uL	12.5uL	12.5uL

7. 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行PCR：

過程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	94℃	3分鐘
PCR反應(yīng) (30個(gè)循環(huán))	94℃	30s
	58℃	40s
	65℃	1分鐘
延伸	65℃	5分鐘

8. 電泳檢測PCR產(chǎn)物。預(yù)期的PCR產(chǎn)物長度為996bp。