英文名稱 Anti-AFAP/AFAP-110
中文名稱 微絲相關(guān)蛋白1抗體科研
別 名 110 kDa actin filament associated protein; 110 kDa actin filament-associated protein; Actin filament associated protein 1; Actin filament associated protein 110 kDa; Actin filament-associated protein 1; AFAP 1; AFAP 110; AFAP; AFAP-110; Afap1; AFAP1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 81kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AFAP
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
抗體的鑒定:
1)微絲相關(guān)蛋白1抗體科研抗體的效價鑒定:鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)

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♈.分子生物學(xué):質(zhì)粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物學(xué):基因合成、引物合成、基因測序、載體構(gòu)建等√
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♈.病毒包裝:腺病毒、慢病毒等√
♈.抗體工程:磁珠分選、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等√
♈.細(xì)胞工程:細(xì)胞表型分析(凋亡、增殖、周期、遷移、侵襲、修復(fù)、克隆形成)、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞膜制備、穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建、細(xì)胞RNAi技術(shù)等√
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用?贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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(1)多種抗體純化服務(wù),如硫酸銨純化、Protein A/G純化、抗原親和純化等;
(2)提供抗體標(biāo)記服務(wù),包括生物素標(biāo)記、熒光素標(biāo)記、酶標(biāo)記等;
(3)多種免疫檢測分析 技術(shù)服務(wù):酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA),免疫印跡(WB),免疫沉淀(IP)和免疫組化(IHC)等。
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Borrelia recurrentis回歸熱疏螺旋體(回歸熱包柔螺旋體)LAMP試劑盒英文名稱:Rhodamine 123
產(chǎn)品規(guī)格:5mg
發(fā)貨周期:1~3天
Rhodamine 123 (羅丹明123, Rh 123)是一種常用的陽離子綠色熒光染料,可以透過細(xì)胞膜從而在活細(xì)胞線粒體內(nèi)聚集,并發(fā)出黃綠色熒光。廣泛用作檢測線粒體膜電位的熒光探針,并且對細(xì)胞沒有任何毒性。
CAS:62669-70-9
分子式:C21H17ClN2O3
分子量:380.82
純度:≥98%(HPLC)
微絲相關(guān)蛋白1抗體科研使用方法
1. 用載玻片準(zhǔn)備細(xì)胞。細(xì)胞數(shù)目應(yīng)為 5×104~5×105個/mL。
2. 孵育該載玻片,用 PBS或Hank’s 液洗滌細(xì)胞。
3. 用培養(yǎng)基稀釋 Rh123母液以制備 1~20μM Rh123緩沖液。具體工作濃度取決于細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。
4. 將 Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育 30 分鐘至 1 小時。
5. 去除 Rh123 緩沖液并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞(洗滌細(xì)胞后為了固定,加入 10%福爾馬林緩沖液并孵育 15~20 分鐘,接著用 PBS洗滌)。
6. 用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
儲存條件:-20℃避光,有效期一年
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