基因敲入小鼠

基因敲入小鼠是指通過(guò)基因工程的方法在目的基因位置引入特定的特變或外源基因的小鼠模型。

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基因敲入小鼠是指通過(guò)基因工程的方法在目的基因位置引入特定的特變或外源基因的小鼠模型。

TurboKnockout^®基因敲入小鼠

TurboKnockout^®基因敲入小鼠是通過(guò)基于ES打靶技術(shù)的TurboKnockout^®技術(shù)，在目的基因位置引⼊特定的突變或外源基因的小鼠模型。比如在目的基因上引入點(diǎn)突變（模擬人類遺傳疾病模型），或?qū)?bào)告基因（如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等）通過(guò)同源重組的方式引入目的基因的特定位點(diǎn)，從而可以通過(guò)報(bào)告基因來(lái)跟蹤目標(biāo)基因的表達(dá)，也可以用報(bào)告基因取代小鼠本身的基因，使KO/KI同時(shí)發(fā)生。

TurboKnockout^®基因敲入小鼠建系原則與流程：

去除抗性基因Neo：選擇陽(yáng)性TurboKnockout^® KI小鼠與野生型小鼠雜交，自刪除Neo，獲得去除打靶載體中的Neo基因的雜合子F1代小鼠。
再挑選⼀對(duì)雜合子F1代小鼠進(jìn)行自交，通過(guò)PCR鑒定篩選得到F2代純合子KI小鼠。

CRISPR-Pro基因敲入小鼠

CRISPR-Pro基因敲入小鼠是通過(guò)CRISPR-Pro技術(shù)在目的基因位置引入特定的突變或外源基因，利用小鼠的表達(dá)調(diào)控元件指導(dǎo)目的基因表達(dá)。例如，將⼀個(gè)可視的標(biāo)記基因（如GFP或lacZ）敲入⼀個(gè)基因位點(diǎn)，以取代目標(biāo)基因的編碼序列，達(dá)到跟蹤該基因表達(dá)的目的�；蛘邔�⼀個(gè)標(biāo)記或⼀個(gè)標(biāo)簽蛋⽩敲入編碼序列的末端（少數(shù)情況下在前端）來(lái)形成⼀個(gè)融合蛋白，以達(dá)到對(duì)目標(biāo)基因表達(dá)和插入位點(diǎn)進(jìn)行檢驗(yàn)的目的。

CRISPR-Pro基因敲入小鼠建系原則與流程：

通過(guò)針對(duì)靶基因設(shè)計(jì)、構(gòu)建gRNA質(zhì)粒并轉(zhuǎn)錄為RNA，再合成含有突變位點(diǎn)信息的donor oligo或donor vector，與Cas蛋白和mRNA⼀起原核顯微注射獲得測(cè)序鑒定陽(yáng)性的F0代小鼠。

F0代陽(yáng)性小鼠與野生型小鼠進(jìn)行交配，獲得PCR和測(cè)序鑒定陽(yáng)性的F1代雜合子小鼠。

選擇來(lái)⾃同⼀只F0代小鼠，敲入位點(diǎn)⼀致的F1代陽(yáng)性小鼠，達(dá)到性成熟后進(jìn)行同胞交配，可獲得F2代小鼠。對(duì)獲得的F2代小鼠進(jìn)行PCR及測(cè)序鑒定，理論上，F(xiàn)2代小鼠中25%為敲入位點(diǎn)⼀致的純合子小鼠，有50%為只有⼀條染色體敲入的雜合子小鼠，有25%為野生型小鼠。

賽業(yè)生物成立于2006年，是國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)、國(guó)家專精特新小巨人企業(yè)，致力于以卓越的模型和服務(wù)助力全球生命科學(xué)。賽業(yè)生物以動(dòng)物模型和細(xì)胞模型為依托，建立了以基因編輯技術(shù)為基礎(chǔ)的體內(nèi)體外疾病模型平臺(tái)，包含智能的基因編輯模式動(dòng)物和高通量體外細(xì)胞模型編輯平臺(tái)、高效的飼養(yǎng)繁育服務(wù)和創(chuàng)新性藥物篩選評(píng)價(jià)模型，從模型到表型功能驗(yàn)證，全方位智能化滿足客戶在基礎(chǔ)研究和新藥研發(fā)領(lǐng)域體內(nèi)體外模型需求。同時(shí)，賽業(yè)生物不斷豐富產(chǎn)品線，強(qiáng)化數(shù)據(jù)和模型優(yōu)勢(shì)，打造了以藥物評(píng)價(jià)模型為依托的創(chuàng)新性CRO服務(wù)平臺(tái)，涵蓋以免疫重建模型為特色的腫瘤藥效平臺(tái)、以眼科為特色的基因治療藥效平臺(tái)、聚焦神經(jīng)、代謝、心血管領(lǐng)域的以核酸藥為特色的藥效平臺(tái)和以HUGO-Ab^®全人源化抗體小鼠為特色的抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)，在賽道轉(zhuǎn)換中再次騰飛。

賽業(yè)生物目前員工人數(shù)超900名，總規(guī)模超40000平方米，在中國(guó)廣州、蘇州、固安設(shè)立有全資子公司，在北京、上海、武漢等城市設(shè)有辦事處，在美國(guó)加州、波士頓和日本大阪設(shè)有子公司。賽業(yè)生物已和全球100多個(gè)國(guó)家和地區(qū)的科學(xué)家及企事業(yè)單位建立了廣泛的合作，產(chǎn)品與技術(shù)已直接應(yīng)用于包括CNS（Cell, Nature, Science）三大期刊在內(nèi)的超10925篇學(xué)術(shù)論文。秉承著為生命科學(xué)創(chuàng)造無(wú)限可能的企業(yè)愿景，賽業(yè)生物愿與全球醫(yī)藥研發(fā)人員共拓美好未來(lái)！

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