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微衛(wèi)星(STR/SSR)檢測(cè)分析
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微衛(wèi)星標(biāo)記(Microsatellite)也稱為短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)或簡(jiǎn)單重復(fù)序列(SSR),是廣泛分布在真核生物基因組中的簡(jiǎn)單重復(fù)序列,一般由一個(gè)長(zhǎng)2~6bp的核心序列經(jīng)多次串聯(lián)重復(fù)排列而成,重復(fù)次數(shù)大多在10~60次之間。微衛(wèi)星中重復(fù)單位的數(shù)目存在高度變異,這些變異表現(xiàn)為微衛(wèi)星數(shù)目的整倍性變異或重復(fù)單位序列中的序列有可能不完全相同,因而造成多個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)性。SSR標(biāo)記能很好地將這些變異揭示出來(lái),不同的SSR在不同的種甚至不同個(gè)體間的多態(tài)性。由于基因組中某一特定的微衛(wèi)星的側(cè)翼序列通常都是保守性較強(qiáng)的單一序列,因而可以將微衛(wèi)星側(cè)翼的DNA片段克隆、測(cè)序,然后根據(jù)微衛(wèi)星的側(cè)翼序列就可以人工合成引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,從而將單個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)擴(kuò)增出來(lái)。由于單個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)重復(fù)單元在數(shù)量上的變異,個(gè)體的擴(kuò)增產(chǎn)物在長(zhǎng)度上的變化就產(chǎn)生長(zhǎng)度的多態(tài)性,這一多態(tài)性稱為簡(jiǎn)單序列重復(fù)長(zhǎng)度多態(tài)性(SSLP),每一擴(kuò)增位點(diǎn)就代表了這一位點(diǎn)的一對(duì)等位基因。由于SSR重復(fù)數(shù)目變化很大,所以SSR標(biāo)記能揭示比RFLP高得多的多態(tài)性。STR分型高效快捷,結(jié)果精確,是非常重要的遺傳標(biāo)記,在基因定位、遺傳育種等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。
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