逐典Chaselection-重組胰蛋白酶使用常見問題答疑

Q1：逐典重組胰蛋白酶配置是否需要過濾?

A1：需要使用0.22μm濾膜除菌過濾，這個(gè)在母液配置和工作液（即稀釋后）的配置中都是需要的。

Q2：逐典重組胰酶產(chǎn)品是否是無菌產(chǎn)品？

A2：不是無菌產(chǎn)品，產(chǎn)品COA中是微生物限度標(biāo)準(zhǔn)為100CFU，所以在配置使用前需要進(jìn)行無菌過濾。

Q3：逐典重組胰蛋白酶的配置有哪些環(huán)節(jié)？分幾步？

A3：重組胰酶從干粉到能直接使用的工作液需要兩大環(huán)節(jié)。第一步：需要配置成低PH的母液，除菌過濾；第二步：再進(jìn)行中性緩沖液稀釋，過濾除菌后就能直接使用了。

Q4：逐典重組胰酶的主要優(yōu)點(diǎn)是那些？

A4：非動(dòng)物來源、GMP環(huán)境生產(chǎn)、高酶活、高穩(wěn)定性。

Q5：逐典重組胰酶的建議使用濃度是多少？

A5：配置母液的濃度是10 mg/ml，配置工作液濃度是0.5 mg/ml。

Q6：逐典重組胰酶產(chǎn)品如何保存？干粉？母液？工作液？

A6：一般來說，我們的干粉產(chǎn)品 -20℃保存 2年沒有問題， 配成母液-20℃保存 1年沒有問題，工作液的話-20℃保存 1-3個(gè)月沒有問題，臨時(shí)用放在4℃可保存一周內(nèi)，但還是建議客戶現(xiàn)用現(xiàn)配。

Q7：消化細(xì)胞的胰酶是不是濃度越高越好？

A7：不是的，一般來說消化細(xì)胞會(huì)有一個(gè)最佳胰酶濃度，達(dá)到最適濃度后濃度升高會(huì)傷害細(xì)胞。

Q8:細(xì)胞消化時(shí)間長是不是意味著胰酶產(chǎn)品性能不行？

A8:一般的細(xì)胞消化時(shí)間3-5min都是很正常的，難消化的細(xì)胞10-15min也是存在的。 細(xì)胞消化時(shí)間長短不能完全決定產(chǎn)品性能，產(chǎn)品的比活、活性、級(jí)別、生產(chǎn)技術(shù)、以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等因素都是評(píng)判產(chǎn)品性能的條件。

Q9:如何控制胰酶消化時(shí)間？

A9:不同細(xì)胞對(duì)消化液的敏感性不同，胰酶消化的時(shí)間也會(huì)有差異。胰酶消化時(shí)間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲(chǔ)存時(shí)間，胰酶的儲(chǔ)存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。

Q10:新細(xì)胞如何使用胰酶消化？

A10:消化對(duì)于新購買的細(xì)胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時(shí)間，可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓，記錄最佳消化時(shí)間，下一次操作參考之前的記錄來控制時(shí)間即可。

Q11:使用胰蛋白酶的時(shí)候加入EDTA是為什么？

A11: EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細(xì)胞前，用EDTA清洗細(xì)胞，以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價(jià)離子。