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電穿孔技術的原理及其在細胞轉(zhuǎn)染中的應用

瀏覽次數(shù):533 發(fā)布日期:2025-5-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
在分子生物學的世界里,科學家們常常需要把“外來分子”送進細胞里,比如質(zhì)粒DNA、siRNA、小分子藥物或蛋白質(zhì)。這項操作看似簡單,實則并不容易,因為細胞膜就像一道防御嚴密的“城墻”,平時滴水不漏。但有一種方法,可以讓這道“城門”在極短的時間內(nèi)打開微小的“入口”——這就是我們今天要講的主角:電穿孔(Electroporation)。

電穿孔是什么?
電穿孔是一種使用短暫高壓電脈沖,在細胞膜上形成暫時性微孔的技術。通過這些微孔,外源性分子(如DNA、RNA等)就能進入細胞內(nèi)部。當電場結(jié)束后,細胞膜通常會在數(shù)秒至數(shù)分鐘內(nèi)自行修復,繼續(xù)保持正常的生命活動。通俗來講,電穿孔就像是“敲門不應,直接刷門禁開門”:在短時間內(nèi)打開細胞膜,讓有用的東西進去,然后迅速恢復原樣。

可逆 vs 不可逆電穿孔根據(jù)電壓和脈沖時間的不同,電穿孔又分為:
  • 可逆電穿孔:常用于科研轉(zhuǎn)染,細胞可以恢復并繼續(xù)存活;
  • 不可逆電穿孔:用于腫瘤消融等醫(yī)療場景,細胞無法修復膜結(jié)構,最終凋亡。

在大多數(shù)生物實驗中,我們使用的是可逆電穿孔,目的就是讓細胞“吃下”我們給它的“外來分子”,卻不會因此死掉。

電穿孔能做什么?
你可能會好奇:把DNA送進細胞干嘛用?科學家做這件事,常見的目標包括:
  • 研究某個基因在細胞中的作用;
  • 沉默一個基因,看看細胞會不會“出狀況”;
  • 建立穩(wěn)定表達外源基因的細胞系;
  • 編輯細胞基因組(如CRISPR/Cas9系統(tǒng));

在細胞治療中,將CAR-T基因?qū)隩細胞中。而這些前沿技術的第一步,往往就是:把“外來分子”送進去。
 

為什么選擇電穿孔?
與病毒轉(zhuǎn)染、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法相比,電穿孔具備幾個突出優(yōu)勢:
  • 非病毒系統(tǒng),無整合風險,更安全;
  • 廣譜適用性,對原代細胞、干細胞、免疫細胞等“難轉(zhuǎn)染”細胞表現(xiàn)出色;
  • 瞬時遞送,無須長時間孵育或復雜制備;
  • 精準控制,可調(diào)節(jié)電壓、電流和脈沖時間,量身定制實驗方案。

小設備,大能量——電穿孔儀的進化
傳統(tǒng)電穿孔儀存在操作復雜、電參數(shù)難以穩(wěn)定控制的問題,尤其對珍貴或敏感細胞(如T細胞、神經(jīng)元、干細胞)不夠友好。

為了讓科研工作者在操作電穿孔時“更穩(wěn)、更準、更簡單”,許多先進實驗室已經(jīng)開始使用如 電穿孔轉(zhuǎn)染系統(tǒng) 這樣的專業(yè)電穿孔平臺。

電穿孔轉(zhuǎn)染系統(tǒng)有何特點?
  • 采用封閉式微量移液管電穿孔技術,避免細胞損失和污染;
  • 參數(shù)精準控制,預設程序適配多種細胞類型;
  • 內(nèi)置優(yōu)化方案,支持原代細胞、干細胞、T細胞等轉(zhuǎn)染;
  • 用戶友好界面,5分鐘學會上手操作。

正因為它既高效又溫和,電穿孔轉(zhuǎn)染系統(tǒng) 在國內(nèi)外眾多細胞治療實驗室、科研機構中廣受青睞,是“精準轉(zhuǎn)染”研究的一大利器。
 

總結(jié)
細胞膜雖有“防火墻”,但科學家已找到一把“鑰匙”——電穿孔。它為分子生物學、基因工程和細胞治療等領域打開了新的大門。而隨著技術不斷迭代,像 電穿孔轉(zhuǎn)染系統(tǒng) 這樣更精細、更友好的電穿孔系統(tǒng),也正在悄悄改變著科研工作者的日常。

下一篇,我們將深入了解電穿孔是如何一步步“把分子送進細胞”的,以及在操作過程中需要注意哪些關鍵步驟。敬請期待!
發(fā)布者:蘇州奎克泰生物技術有限公司
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