YWHAG 缺失擾亂 EMT 相關(guān)網(wǎng)絡(luò)誘導(dǎo)氧化性細(xì)胞死亡并抑制癌癥轉(zhuǎn)移

癌癥轉(zhuǎn)移是晚期癌癥患者主要的死亡原因，其中上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是癌細(xì)胞通過(guò)血液循環(huán)從原發(fā)部位遷移至遠(yuǎn)端器官的重要過(guò)程。本研究聚焦于YWHAG（14-3-3γ蛋白編碼基因）在癌細(xì)胞EMT過(guò)程中調(diào)控作用，解析其作為腫瘤信號(hào)節(jié)點(diǎn)的機(jī)制及臨床意義。
 

轉(zhuǎn)移涉及上皮細(xì)胞向間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT），這一過(guò)程受復(fù)雜的基因網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，故意破壞這些網(wǎng)絡(luò)可能會(huì)產(chǎn)生良好的結(jié)果。然而，人們對(duì)協(xié)調(diào)這些轉(zhuǎn)移相關(guān)網(wǎng)絡(luò)的機(jī)制知之甚少。為了填補(bǔ)這一空白，研究人員通過(guò)分析發(fā)生 EMT 的不同癌細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)錄組，確定了在各種人類癌癥中具有廣泛參與性的樞紐基因。致癌信號(hào)適配蛋白酪氨酸3-單加氧酶/色氨酸5-單加氧酶活化蛋白γ（YWHAG）因其臨床相關(guān)性和影響而名列前茅。通過(guò)調(diào)查細(xì)胞激酶組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，構(gòu)建了 YWHAG 的調(diào)控組，揭示了癌癥 EMT 過(guò)程中的應(yīng)激反應(yīng)和代謝過(guò)程。研究表明，調(diào)控組中的YWHAG依賴性細(xì)胞保護(hù)機(jī)制嵌入了EMT相關(guān)網(wǎng)絡(luò)，通過(guò)增強(qiáng)EMT過(guò)程中的自噬作用保護(hù)癌細(xì)胞免受氧化災(zāi)難。YWHAG 缺乏會(huì)導(dǎo)致活性氧（ROS）快速積累、EMT 延遲和細(xì)胞死亡。腫瘤異種移植顯示，轉(zhuǎn)移潛力和總生存時(shí)間與癌細(xì)胞株的 YWHAG 表達(dá)水平相關(guān)。與原發(fā)性腫瘤相比，轉(zhuǎn)移性腫瘤的 YWHAG 和自噬相關(guān)基因表達(dá)量更高。沉默 YWHAG 可減少原發(fā)腫瘤體積、防止轉(zhuǎn)移并延長(zhǎng)小鼠的中位生存期。

本研究揭示了YWHAG 在EMT和腫瘤轉(zhuǎn)移中的關(guān)鍵調(diào)控作用，提出通過(guò)擾亂YWHAG 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)可能成為抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的新策略。這為開(kāi)發(fā)基于非酶蛋白的治療手段提供了科學(xué)依據(jù)，也為改善晚期癌癥患者預(yù)后帶來(lái)潛在希望。

激酶抑制劑陣列：用兩種激酶抑制劑（SYN- 2103；SYNkinase，澳大利亞維多利亞州；TargetMol，美國(guó)馬薩諸塞州）處理 MKN74 和 YWHAG 敲除的 MKN74（MKN74siYWHAG）細(xì)胞，這兩種激酶抑制劑由 188 種不同的小分子抑制劑組成，共針對(duì) 130 種獨(dú)特的蛋白激酶。使用JuLI™ Stage活細(xì)胞成像分析系統(tǒng)對(duì)處理過(guò)的細(xì)胞進(jìn)行 48 小時(shí)成像。細(xì)胞群多元中心點(diǎn)之間的歐氏距離被視為遷移距離，在 48 小時(shí)內(nèi)每隔 4 小時(shí)測(cè)量一次。遷移距離的時(shí)間變化以曲線下面積（AUC）表示，并在野生型 MKN74 和 MKN74siYWHAG 之間進(jìn)行比較，以確定與 EMT 有關(guān)的蛋白激酶。