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小動物臭氧暴露染毒對哮喘影響的實驗方案

瀏覽次數:373 發(fā)布日期:2025-6-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
小動物臭氧暴露染毒對哮喘影響的實驗方案
 
 
近日,復旦大學公共衛(wèi)生學院陳仁杰教授、徐燕意副教授課題組,以“關聯—因果—機制—干預”為研究框架,深入探討了短期臭氧暴露對哮喘加重的影響和作用機制。研究結果以“Mechanistic Insights into Ozone-Induced Asthma Exacerbation: Role of Oxidative Stress and IL-33”為題發(fā)表于《Journal of Hazardous Materials》
 
(一)大小鼠臭氧暴露染毒實驗方案
1. 研究背景
臭氧(O₃)是一種常見的大氣污染物,主要由氮氧化物和揮發(fā)性有機物在陽光照射下發(fā)生光化學反應生成。近年來,隨著城市化進程的加快和全球氣候變暖,臭氧污染問題日益嚴重,對呼吸系統(tǒng)健康構成重大威脅。哮喘作為一種常見的慢性氣道疾病,其急性發(fā)作與臭氧暴露密切相關。研究表明,臭氧暴露不僅會加重哮喘患者的癥狀,還會通過誘導氧化應激、炎癥反應和免疫失衡等機制,進一步惡化氣道高反應性(AHR)和肺功能。因此,深入探討臭氧暴露對哮喘的影響及其作用機制,對于制定有效的環(huán)境健康政策和干預措施具有重要意義。
2. 主要研究儀器
本實驗采用北京元森凱德生物技術公司研制生產的YSKD小動物臭氧暴露染毒儀,該設備具備高效臭氧發(fā)生器和氣溶膠均勻染毒設計,能夠精確控制臭氧濃度【臭氧產量可控,臭氧暴露濃度實時可以監(jiān)測】,適用于多種呼吸系統(tǒng)疾病模型的建立。該設備可廣泛應用于哮喘、氣道高反應性、慢性阻塞性肺。–OPD)等研究領域,為臭氧暴露對呼吸系統(tǒng)的影響提供可靠的實驗平臺。

3. 實驗方案
3.1 實驗對象
  • 動物模型:C57BL/6J小鼠,6周齡,雌雄各半。
  • 分組:每組10只,共4組。
    • 對照組:暴露于潔凈空氣(過濾空氣)。
    • O單獨暴露組:暴露于一定濃度臭氧,6小時/天。
    • 哮喘模型組:通過卵清蛋白(OVA)致敏和挑戰(zhàn)建立哮喘模型。
    • O+哮喘模型組:在哮喘模型基礎上,暴露于一定濃度臭氧,6小時/天。
3.2 實驗設計
  • 致敏與挑戰(zhàn):哮喘模型組通過皮下注射OVA(10 μg/只)建立過敏性哮喘模型,隨后通過北京元森凱德生物技術公司研制生產的YSKD氣管肺遞送裝置,氣管內霧化OVA進行挑戰(zhàn),以誘導氣道炎癥和高反應性。
  • 臭氧暴露:O₃暴露組和O₃+哮喘模型組在哮喘模型建立后,通過YSKD小動物臭氧暴露染毒儀進行臭氧暴露,暴露時間為6小時/天,連續(xù)暴露7天。
  • 監(jiān)測指標:在暴露前后,分別測量小鼠的肺功能(如FEV1、FVC)、氣道高反應性(AHR)、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中的細胞計數和炎癥因子(如IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α、4-HNE等),以及肺組織病理切片。
3.3 暴露條件
臭氧發(fā)生器:采用高效臭氧發(fā)生器,確保臭氧濃度穩(wěn)定。
環(huán)境控制:實驗室內溫度和濕度控制在±10%以內,以減少環(huán)境干擾。
數據記錄:每30分鐘記錄一次臭氧濃度,確保暴露條件符合實驗要求。
4. 研究結果及實驗注意事項
4.1 研究結果
肺功能變化:O₃暴露組和O₃+哮喘模型組的肺功能指標(如FEV1、FVC)顯著下降,表明臭氧暴露加重了哮喘患者的肺功能損害。
氣道高反應性:O₃+哮喘模型組的AHR顯著增強,提示臭氧暴露通過增加氣道敏感性,進一步加重哮喘癥狀。
炎癥反應:O₃+哮喘模型組的BALF中嗜酸性粒細胞、中性粒細胞數量顯著增加,且IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α等炎癥因子水平顯著升高。
氧化應激:O₃+哮喘模型組的肺組織中4-羥基-2-壬烯醛(4-HNE)和增殖細胞核抗原(PCNA)表達上調,表明臭氧暴露誘導了氧化應激反應。
免疫失衡:O₃+哮喘模型組的Th2細胞因子(如IL-4、IL-5、IL-13)和Th17細胞因子(如IL-17)水平顯著升高,提示臭氧暴露通過干擾免疫平衡,加重哮喘急性發(fā)作。
4.2 實驗注意事項
動物健康狀態(tài):實驗前需確保小鼠健康,無感染或疾病史。
臭氧濃度控制:臭氧發(fā)生器確保臭氧濃度穩(wěn)定,可以實時監(jiān)測臭氧暴露濃度。
環(huán)境控制:實驗室內溫度和濕度需嚴格控制,避免環(huán)境因素干擾實驗結果。
數據記錄:實驗過程中需詳細記錄每只小鼠的暴露情況和生理指標變化,確保數據的準確性和可重復性。
倫理審查:實驗方案需通過動物倫理委員會審批,確保實驗符合動物福利和倫理要求。
5. 結論
本實驗通過建立哮喘小鼠模型,并結合臭氧暴露,系統(tǒng)探討了臭氧對哮喘加重的影響及其作用機制。研究結果表明,臭氧暴露通過誘導氧化應激、炎癥反應和免疫失衡,顯著加重哮喘患者的肺功能損害和氣道高反應性。這些發(fā)現為理解臭氧暴露對哮喘急性發(fā)作的病理生理機制提供了重要實驗依據,也為制定有效的環(huán)境健康政策和干預措施提供了科學支持。
 
(二)案例分享:環(huán)境因素O3和UVA對6PPD老化反應和毒性的影響
廣東省科學院生物與醫(yī)學工程研究所/廣州醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院/生態(tài)環(huán)境部華南環(huán)境科學研究所等在中科院一區(qū)TOP期刊(IF=12.2)Journal of Hazardous Materials 486 (2025) 137000 發(fā)表題為《Environmental factors ultraviolet a and ozone exacerbate the repeated inhalation toxicity of 6PPD in mice via accelerating the aging reaction》

本文作者通過北京元森凱德生物技術有限公司 研制生產的動物霧化吸入暴露系統(tǒng),使小鼠暴露于不同老化條件下的6PPD氣溶膠中。6PPD及其老化產物的氣溶膠濃度為0.6 μg/L,每天1小時,每周6天,持續(xù)5周和10周。通過北京元森凱德生物技術有限公司YSKD動物吸入暴露系統(tǒng)的使用,研究者能夠模擬人類在實際環(huán)境中的吸入暴露情況,為評估6PPD及其老化產物的毒性提供了重要的實驗數據。

該研究首次揭示了環(huán)境因素O3和UVA對6PPD老化反應和毒性的影響。研究結果表明,6PPD及其老化產物在吸入后表現出不同的毒性特征,特別是UVA處理后的6PPD可能形成新的有毒產物。隨著大氣中O3濃度的增加,6PPD向老化產物的轉化可能加速,由此產生的二次污染不容忽視。這項研究為評估和管理6PPD的環(huán)境和健康風險提供了新的視角。
 
 
附:北京元森凱德生物技術有限公司研制生產的動物霧化吸入給藥儀器,主要包括大/小動物肺部氣管直接遞送裝置(動物氣道霧化針)、動物口鼻吸入、僅鼻腔給藥、全身式暴露染毒、動物煙氣/PM2.5染毒系統(tǒng)、粉塵氣溶膠發(fā)生器、臭氧動物暴露裝置、動物高低壓氧艙,此外給客戶多樣化提供自動型實驗動物安樂死系統(tǒng)(窒息系統(tǒng)、二氧化碳安樂處死箱),實驗動物除臭暫存系統(tǒng),巴馬香豬皮,NGI Gentle Rocker智能洗盤裝置,NGI新一代撞擊器和ACI安德森撞擊器的校驗與檢測。
 
附:北京元森凱德生物技術有限公司(BEIJING YSKD BIO-TECHNOLOGY CO.,LTD),簡稱元森凱德(YSKD),2013年成立于北京中關村科技園,是一家專業(yè)從事生命科學類實驗儀器研制、生產與銷售的科技創(chuàng)新型企業(yè)。服務毒理學、藥理學、免疫學、生物安全、大氣污染物、化學物質毒性鑒定、臨床前藥物開發(fā)與安全性評價、呼吸系統(tǒng)、環(huán)境與健康等領域。
 
部分用戶案例:哈佛大學,麻省理工學院,新加坡國立大學,瑞士蘇黎世聯邦理工學院,中國科學院上海藥物研究所,中國中醫(yī)科學院中藥研究所,麗珠醫(yī)藥集團股份有限公司,康龍化成(寧波)生物醫(yī)藥有限公司,中日醫(yī)院呼吸病學研究中心/中日友好臨床醫(yī)學研究所,北京中醫(yī)藥大學,中國藥科大學,沈陽藥科大學,復旦大學,浙江大學,四川大學,中南大學湘雅醫(yī)學院等
 
 
發(fā)布者:北京元森凱德生物技術有限公司
聯系電話:17810632981
E-mail:yskdsales@163.com

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