霍亂毒素B亞單位CTB在神經(jīng)學研究、免疫佐劑領(lǐng)域中的應用

CTB 的結(jié)構(gòu)與特性
霍亂毒素（cholera toxin，CT）是霍亂弧菌產(chǎn)生的腸毒素，由1個A亞單位（CTA）和5個B亞單位（CTB）形成的五聚體共價連接而成，CTA為毒性亞單位，CTB為無毒的受體結(jié)合亞單位，可以和所有核細胞膜上的神經(jīng)結(jié)苷脂（GM1）受體結(jié)合，CTA通過CTB的作用進入細胞發(fā)揮其毒性作用。

CTA 是毒素的活性核心，具有 ADP 核糖基轉(zhuǎn)移酶活性；而 CTB 則由 5 個相同的亞基裝配成五聚體，能夠以高親和力與表達于多種有核細胞膜上的 GM1 神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合。這種結(jié)合特性不僅是霍亂毒素發(fā)揮作用的重要環(huán)節(jié)，更為 CTB 在科研和醫(yī)療領(lǐng)域的應用奠定了基礎(chǔ)。值得一提的是，CTB 處理的組織培養(yǎng)細胞和動物組織不會出現(xiàn)死亡或壞死現(xiàn)象，這一特性使得它在眾多研究和應用中具有獨特的優(yōu)勢。

CTB 在神經(jīng)學研究中的逆行示蹤應用
在神經(jīng)學研究領(lǐng)域，CTB 作為逆行示蹤劑大放異彩。它能憑借與神經(jīng)節(jié)苷脂 GM1 戊多糖鏈的特異性結(jié)合，被富含 GM1 的神經(jīng)細胞選擇性攝取，進而精確標記神經(jīng)細胞。在進行逆行示蹤實驗時，通常會將 CTB 配置成 1% 的磷酸鹽緩沖液。早期，CTB 以非熒光示蹤劑的身份參與逆行示蹤技術(shù)，隨著技術(shù)的發(fā)展，熒光結(jié)合形式的 CTB 應運而生，成為了常用的熒光示蹤劑。借助這種熒光標記的 CTB，研究人員可以更加直觀地觀察神經(jīng)細胞的形態(tài)和連接。

以發(fā)表于《Frontiers in Neuroanatomy》的研究為例，研究人員向 SD 大鼠腦脊液接觸的核細胞注射 CTB，7 - 10 天后對大鼠進行灌流，取全腦和脊髓切片進行 CTB 免疫熒光檢測。通過熒光顯微鏡觀察下皮層和邊緣系統(tǒng)中的 CTB 陽性神經(jīng)元，并利用軟件進行三維重建，成功識別和觀察了腦脊液中來自下皮層和邊緣系統(tǒng)的核細胞，為深入理解這些核細胞的生物學功能提供了有力依據(jù)。

CTB 在免疫佐劑領(lǐng)域的卓越貢獻
除了在神經(jīng)學研究中的重要應用，CTB 在免疫佐劑領(lǐng)域也有著卓越的表現(xiàn)。去除了毒性的 CTB，保留了強大的免疫原性和佐劑活性。在免疫反應過程中，它對調(diào)節(jié)抗原呈遞細胞（APC）反應、T 細胞反應以及抗體產(chǎn)生起著關(guān)鍵作用。在病毒疫苗、DNA 疫苗以及腫瘤和自身免疫病治療疫苗的研究中，CTB 都取得了顯著進展。

在發(fā)表于《Mucosal Immunology》的一項研究中，研究人員為了探究 CpGs 對 H9N2 全滅活流感病毒的佐劑作用，分別用 PBS、單獨 H9N2 全滅活流感病毒、CpGs 聯(lián)合 H9N2 全滅活流感病毒，以及經(jīng)典的粘膜佐劑 CT 及其 B 亞單位（CTB）免疫小鼠。研究結(jié)果令人矚目，發(fā)現(xiàn) CpGs/CT/CTB 聯(lián)合 H9N2 全滅活流感病毒（WIV）誘導產(chǎn)生的血清抗原特異性 IgG、IgG1 和 IgG2a/c 抗體滴度，明顯高于單純抗原處理組（P＜0.01）。同時，小腸、氣管和肺黏膜洗液中的 IgA 水平也顯著增強。這充分表明 CTB 能夠有效增強疫苗的免疫效果，提升機體的免疫反應。

未來展望
隨著對 CTB 研究的不斷深入，其潛在的應用價值也在不斷被挖掘。未來，在神經(jīng)學研究方面，CTB 或許可以幫助研究人員進一步揭示神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、衰老以及神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機制。在疫苗研發(fā)領(lǐng)域，CTB 有望成為增強疫苗效果、拓寬疫苗應用范圍的關(guān)鍵要素，為應對各種傳染病和難治性疾病提供更有效的免疫策略。盡管目前 CTB 的應用已經(jīng)取得了一定成果，但仍有許多未知等待探索，科研人員需要不斷優(yōu)化其使用方法，深入研究其作用機制，以充分發(fā)揮 CTB 的潛力，為生物醫(yī)學領(lǐng)域帶來更多的驚喜與突破。